LES STREPTOCOCCACEAE

Aspect microscopique Streptococoques: Coques en longue chaînette Gram +

Pneumocoques: Coques regroupés par 2 et capsulés Gram + Entérococcus: Coques ovoïde regroupés en petite chaînette Gram +

Les antigènes des Streptococcus Capsule éventuelle Pili (protéine M) Polyoside C Peptidoglycane Cytoplasme Membrane plasmique Des acides teichoïques sont souvent présents comme chez Staphylococcus. D’autres protéines peuvent également être observées en surface.

Tests complémentaires à l’étude des Streptococcus Test de résistance à la bacitracine et à l’optochine Ensemencer la gélose en quadrant Déposer sur le quadrant 1 et 2: un disque antibiotique d’optochine un disque antibiotique de bacitracine OPT BAC   Incuber 24 heures à 37°C

Lecture de la résistance à la bacitracine Culture autour du disque d’antibiotique  les bactéries sont résistantes à la bacitracine Zone d’inhibition d’au moins 12 mm autour du disque d’antibiotique  les bactéries sont sensibles à la bacitracine

Remarque: un Streptococcus sensible à la bacitracine et  hémolytique  suspicion de Streptococcus du groupe A (à confirmer avec un groupage)

Lecture de la résistance à l’optochine Culture autour du disque d’antibiotique ou zone d’inhibition peu importante  les bactéries sont résistantes à l’optochine Zone d’inhibition autour du disque d’antibiotique > 12 mm  les bactéries sont sensibles à l’optochine Remarque: un Streptococcus sensible à l’optochine et  hémolytique  suspicion d’un pneumocoque.(à confirmer par une identification antigénique)

Groupage des Streptococcus 1 ère étape: extraction de l’Ag à identifier Elle consiste en l’extraction de l’Ag polyosidique C sous l’action d’une enzyme. On obtient un extrait antigénique (solution contenant l’Ag). Prélever une colonie suspecte sur la gélose et l’émulsionner dans 400 µl de réactif d’extraction (8 gouttes) Incuber 15 min à 37°C

2nde étape: formation du complexe Ag-Ac Anti A Anti B Contrôle 1 goutte de contrôle 1 goutte d’extrait Identification de Streptococcus B 1 goutte de particule de latex sensibilisé anti A ou B … 1 goutte d’extrait Pas de réaction  les tests peuvent être effectués Réaction d’agglutination  Identification du Streptococcus par rapport au latex sensibilisé. (réaction Ag-Ac spécifique)

CORRECTION DU TP Observation du bouillon après coloration de Gram Bacilles coloration bipôlaire Gram - Coques en chaînette Gram +  Streptocoques Présence d’un mélange bactérien contenant: des bactéries du genre Streptococcus des bactéries de la famille des Entérobactéries.

Grosses colonies blanches sur gélose trypticase soja. Lecture des milieux Grosses colonies blanches sur gélose trypticase soja. Streptococcus G (identifié sur test agglutination) Petites colonies sur gélose trypticase soja. Hydrolyse l’esculine sur gélose BEA Présence dans le bouillon initial d’un mélange bactérien: Streptococcus G BG- coloration bipolaire  suspicion d’entérobactérie Bacilles Gram -