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Analyses en multiplex Le Bio-Plex Luminex Bio-Plex Analyse simultanée de nombreuses substances sur de faibles volumes déchantillons (30ul de plasma,

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2 Analyses en multiplex Le Bio-Plex Luminex

3 Bio-Plex Analyse simultanée de nombreuses substances sur de faibles volumes déchantillons (30ul de plasma, surnageants, etc). 4 grandes familles dapplications: Le Bio-Plex (www.luminexcorp.com ) est un système ouvert :www.luminexcorp.com - réactifs commerciaux - vos propres réactifs basés sur les billes de la société Luminex

4 Champs dapplications - réactifs commerciaux Cell biology Phosphoprotein assays (www.bio-rad.com)www.bio-rad.com Transcription factor assays (www.biosource.com, linco: Hormones Cytokines (inflammation, adipokines) (www.bio-rad.com, Endocrine hormones (www.labodia.com)www.labodia.com Pituitary hormones (www.labodia.com)www.labodia.com Metabolic markers cardiovascular diseases (www.labodia.com)www.labodia.com bone metabolism (www.labodia.com)www.labodia.com apolipoproteins (www.labodia.com)www.labodia.com apoptosis (www.labodia.com)www.labodia.com Nucleides RNA assay (www.panomics.com)www.panomics.com Des réactifs commerciaux sont disponibles pour: lhomme, le singe, le rat, la souris, le chien.

5 Panel et prix : mouse cytokines Note: de nombreuses autres possibilités sont proposées par les sites commerciaux

6 Panel et prix : mouse bone markers Note: de nombreuses autres possibilités sont proposées par les sites commerciaux

7 Panel et prix : mouse endocrine Note: de nombreuses autres possibilités sont proposées par les sites commerciaux

8 Panel et prix : human gut hormones Notes: de nombreuses autres possibilités sont proposées par les sites commerciaux.

9 Nombre de tests par kit Le Bio-Plex ne peut être utilisé au coup par coup. Son unité de travail est une plaque de 96 puits. De ces 96 puits, 20 sont nécessaires à létalonnage et à la validation de chaque dosage. 1 kit = 1 plaque = 38 échantillons en double ou 76 échantillons en simple Faut-il mesurer systématiquement les échantillons en double? Oui si vous êtes en phase finale dun projet et si vous devez quantifier très précisément des variations de concentrations très faibles Non si vous disposez de doubles biologiques ou si vous êtes en phase exploratoire

10 Planification de lexpérience PlanificationImpératif : prendre contact au moins 15 jours à lavance pour disponibilité et renseignements en vue des analyses à effectuer ÉchantillonsSont à apporter déjà centrifugés et prélevés conformément à la notice du kit (nous demander) NumérotationClaire, bien lisible et indélébile Volume En supplément 30ul pour dosages en simple et 75ul pour duplicats Fournir 15 ml de milieu de culture frais lorsque les échantillons sont des surnageants de culture AnalysesPréciser types de dosages et nombre déchantillons Nature du projetQuelques mots sur la nature du test et les conditions de prélèvement

11 Nature des échantillons En recherche clinique humaine Plasma, sérum, urine, expectoration, LCR, Liquide bronchoalvéolaire, secrétions vaginales, liquide de ponction articulaire En recherche fondamentale Plasma, sérum, urine, divers liquides histologiques, extrait de tissus, culture cellulaire, milieu de culture. (liste non limitative) Jamais de solvants organiques, détergents < 2 %

12 Prélèvements des échantillons et volumes Sang : préférer systématiquement le plasma EDTA à toute autre forme de collecte Attention aux sérums lipémiques, hémolysés ou visqueux et aux protéines instables dans le plasma (ACTH, glucagon, GLP-1, etc: prélever le sang en présence dinhibiteurs de protéases). Bio-Plex = petits volumes pour un grand nombre danalyses 30 µl de plasma pour 30 cytokines humaines ou 22 cytokines de souris Attention : pour un dosage en double, fournir 75 µl de plasma à notre laboratoire

13 Rendu des résultats Les résultats sont sortis sur imprimante et sont transmis par sous forme de tableau Excel avec toutes les données utiles.

14 Demande danalyses Date Nom Groupe Nombre déchantillons Nature des échantillons (plasma, surnageant etc.) Type de dosage Nature du projet (type de souris) Adresse Formulaire à remettre avec les échantillons

15 Conditions dutilisation La plate-forme propose divers dosages effectués sur plasma et milieu de culture à laide de kits commerciaux Lunité dutilisation est un kit complet soit 76 échantillons La responsabilité de la plate-forme nest pas engagée en cas de résultats douteux obtenus sur des échantillons incompatibles (hyperlipémiques hémolysés, visqueux etc…) ou des vices de fabrication des kits

16 Contact Jours : mardi jeudi vendredi 021/ labo génotypage ou 021/ labo 2022 Mail to: Laborantine responsable :Marianne Carrard Superviseur de la plateforme :Frédéric Preitner Directeur de la plateforme :Bernard Thorens


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