Validation des méthodes de nettoyage et désinfection Licence Professionnelle: Génie des Procédés et Environnement Guillaume Depuille

Sommaire 1. Les Laboratoires LYOCENTRE 2. Validation des méthodes de nettoyage et désinfection 3. Recherches et expérimentations Conclusion

Les Laboratoires LYOCENTRE Laboratoire pharmaceutique créé après la guerre Deux sites: Le site Administratif à Clermont-Ferrand Le site Production implanté à Aurillac depuis 1975 81 employés Chiffre d’affaires de 9 235 000 € dont 73% réalisé à l’export en 2008

1. Les Laboratoires LYOCENTRE Les pays export

1. Les Laboratoires LYOCENTRE Spécialisés dans les probiotiques Gamme Gynécologique Gastro-entérologique Lyophilsation Lactobacillus casei variété rhamnosus Lcr35®

1. Les Laboratoires LYOCENTRE Gel de toilette intime Glucuronamide

1. Les Laboratoires LYOCENTRE Assurance Qualité 1 responsable AQ 1 pharmacien AQ - Ingénieur environnement 1 assistante Qualification / Validation / Métrologie 2 assistantes AQ Sous la responsabilité directe du directeur général - pharmacien responsable respect des exigences légales, règlementaires, normatives AFSSaPS Code de la santé publique Assurer la qualité des produits et proposer des solutions Pharmacopées BPF

2. Nettoyage et désinfection Validation des méthodes de nettoyage et désinfection des locaux et équipements aux ferments lactiques Démontrer que la contamination résiduelle est inférieure à une limite fixée Mettre en place des méthodes de prélèvement de nettoyage et désinfection

2. Nettoyage et désinfection Locaux et équipements aux ferments lactiques Contrôles bactériologiques Locaux en production pharmaceutiques Contrôles bactériologiques et chimiques 2 axes de travail distincts

2. Nettoyage et désinfection Eléments traceurs Lcr35®, risque de contamination croisée d’un lot à l’autre, et les levures et moisissures Critère d’acceptation 50 points par gélose

2. Nettoyage et désinfection Méthode de groupage Points critiques Point critique

2. Nettoyage et désinfection Rédaction Approbation Réalisation des tests Validation

2. Nettoyage et désinfection Bilan Rapports rédigés Tests effectués Tests conformes et validés Rapports équipements 12 11 8 Rapports locaux 4

3. Recherches et expérimentations Recherches pour la validation des méthodes de nettoyage et désinfection des locaux de la production pharmaceutique Méthode de prélèvement mise en place par une précédente stagiaire

3. Recherches et expérimentations Production mettant en jeu des hormones Etats des lieux Traces inexplicables d’hormones Nettoyage avec un anti-biofilm Tests sur les vecteurs Taux de recouvrement <50% 2 problèmes identifiés

3. Recherches et expérimentations Dépot A l’aide d’un cadre, on forme une surface de 100 cm² 1mL d’une solution d’estriol dans de l’éthanol de concentration théorique de 399 µg/mL Méthode de prélèvement et d’analyse Prélèvement Après 1 h, les échantillons avec 3 compresses imbibés d’éthanol qui seront placés dans un tube Après 1 heure sous hotte, on ajoute 20 mL d’éthanol absolu et on ferme le tube à essai. Analyse Le tube est vortexé 3 fois 2 minutes avec une latence de 30 minutes entre chaque vortexage. Il est ensuite analysé par une HPLC avec 2 détecteurs : un fluorimètre et un détecteur UV.

3. Recherches et expérimentations Planification des expériences Matrice d’Hadamard Identifier les facteurs influents Facteur Analyses mathématiques Niveau -1 Niveau +1

3. Recherches et expérimentations Facteurs étudiés Facteurs -1 1 X1 Phase mobile 50/50 Phase mobile 70/30 X2 Etalé Normal X3 Ecouvillon Compresse X4 Sol lisse Sol rugueux X5 Sol nettoyé (javel) Sol normal X6 10mL 20mL X7 Vortex normal Vortex 1 min X8 Prélever après 1h Prélever instantanément X9 Pas cadre Cadre X10 3 compresses 2x3 compresses X11 Dépôt normal Dépôt plus élevé

3. Recherches et expérimentations Matrice d’Hadamard Coefficients de facteurs

3. Recherches et expérimentations Approche de Lentz σ0 = médiane des coefficients de facteurs x 1,5

3. Recherches et expérimentations Conclusions Facteurs influents Méthode de prélèvement non optimale Facteurs -1 1 X1 Phase mobile 50/50 Phase mobile 70/30 X4 Sol lisse Sol rugueux X8 Prélever après 1h Prélever instantanément X10 3 compresses 2x3 compresses

3. Recherches et expérimentations Perspectives Analyser les sols Etudier le critère d’acceptation Revoir la méthode de prélèvement

Conclusions Découverte d’un secteur Première expérience dans la Qualité Exigences des normes Compétences Organisation du travail Initiatives Contacts et partage d’expériences

Merci de votre attention