Sous la direction de PH JARREAU et C MEHATS MASTER 2 CVHR Avril 2008 Recherche d’un effet préventif de l’association du PEG et d’un inhibiteurs de PDE4 dans un modèle de troubles du développement alvéolaire COUROUBLE Mélanie Sous la direction de PH JARREAU et C MEHATS Inserm U767 Site Saint-Vincent de Paul Inserm U841 Eq 06 Faculté de médecine-Créteil

Introduction Incidence DBP : 501-1500 g = 22% mais 501-750g = 46% Dysplasie bronchopulmonaire (DBP): première description en 1967 par Northway Maladie pulmonaire chronique des prématurés Risque de DBP corrélé à l’âge gestationnel et au poids de naissance Incidence DBP : 501-1500 g = 22% mais 501-750g = 46% Fanaroff, AJOG 2007 Jobe, AJRCCM 2001

Introduction Définition : ventilation et/ou oxygénodépendance à J28 critère de sévérité : persistance de l’oxygénodépendance à 36SA d’âge corrigé Développement anormal alvéolaire et vasculaire Jobe, AJRCCM 2001

structures alvéolaires larges Arrêt de l’alvéolisation Histologie de la DBP Développement normal Nouveau-né prématuré DBP Peu d’alvéoles structures alvéolaires larges Capillaires dysmorphiques Arrêt de l’alvéolisation Coalson, 2006 Husain, 1998

Physiopathologie de la DBP Anténatal: Chorioamniotite Postnatal agression - ventilation mécanique Infections/inflammation Oxygène Immaturité pulmonaire Facteurs génétiques Inflammation pulmonaire cible thérapeutique +++ Speer,2006 Kinsella, 2006 Jobe, 2001 DBP

Prévention and traitement de la DBP Immaturité pulmonaire Anténatal: -corticothérapie -antibiothérapie Postnatal - Ventilation optimisée surfactant adaptation SaO2 agression Immaturité pulmonaire Facteurs génétiques Inflammation pulmonaire corticothérapie postnatale Stevenson, 2007 Speer,2006 Kinsella, 2006 Jobe, 2001 DBP

Prévention and traitement de la DBP Immaturité pulmonaire Anténatal: -corticothérapie -antibiothérapie Postnatal - Ventilation optimisée surfactant adaptation SaO2 agression Immaturité pulmonaire Facteurs génétiques Inflammation pulmonaire PDE4 inhibiteurs corticothérapie postnatale Stevenson, 2007 Speer,2006 Kinsella, 2006 Jobe, 2001 DBP

Phosphodiesterases 4 (PDE4) ↑survie ↑dégranulation ↑ production d’ac. Arachidonique ↑ROS ↑LTC4 Pro-inflammatoire ↑ROS ↑LTB4 ↑chimiotactisme ↑IL8 ↑phagocytose Neutrophile Macrophage Lymphocytes T & B Eosinophile Mastocyte ↑dégranulation ↑fibrosise ↑remodelage Fibroblaste PDE4 Cellule épithelial ↑IL6, TNF Cellule endotheliale ↑ TNF ↑LTB4 ↑ production d’ac. arachidonique ↓IL10 Muscle lisse ↑ Permeability vascular ↑ Adhesion protein expression ↑IL2, IL4,IL5 ↑proliferation ↑contraction Fan Chung, 2006

Phosphodiesterases 4 (PDE4) rolipram ATP cAMP 5’AMP inhibiteurs PDE4 : action anti-inflammatoire Étude Clinique : BPCO : phase III : Amélioration fonction respiratoire Diminution de l’inflammation pulmonaire Rabe, 2005 Beavo, 2006 Fan Chung, 2006 Grootendorst, 2007

modèle murin de DBP modèle hyperoxique modèle LPS intratrachéale ==> inflammation pulmonaire défaut d’alvéolisation

Effets des inhibiteurs PDE4 sur le modèle murin de DBP Augmentation de la Survie effet anti-inflammatoire hyperoxie Pas d’effet sur l’alvéolarisation rolipram Pas d’effet anti-inflammatoire effect délétaire sur l’alvéolarization LPS

Effets des inhibiteurs PDE4 sur le modèle murin de DBP Augmentation de la Survie effet anti-inflammatoire hyperoxie Pas d’effet sur l’alvéolisation rolipram Pas d’effet anti-inflammatoire effet délétère sur l’alvéolisation LPS Pas d’effet anti-inflammatoire PEG LPS ! Amélioration de l’alvéolisation

Polyethylène glycol PEG polymère hydrosoluble Utilisé comme solvant du rolipram Possible activité de type matrice extra-cellulaire effets potentiels antiprolifératif et pro-apoptotique Parnaud, 2001 Karlsson, 2004 Raeber, 2005

effets inh PDE4 et PEG sur des ratons exposés à l’hyperoxie HYPOTHESE : Action synergique des inh PDE4 et du PEG ? sur la survie sur l’inflammation et, le plus important sur l’alvéolisation

Protocole d’étude Ratons de type Sprague-Dawley normoxie hyperoxie PEG + rolipram PEG + rolipram PEG Saline PEG Saline normoxie hyperoxie

Protocole d’étude sacrifice HYPEROXIE / NORMOXIE Supplémentation PEG 2.5% +/- rolipram 0.25mg/kg Ou sérum physio sacrifice HYPEROXIE / NORMOXIE J6 J10 J0 Analyse de l’inflammation: LBA, cellularité, taux de cytokines Alvéolisation: morphométrie