LES MILIEUX D’IDENTIFICATION DES VIBRIO ET PSEUDOMONAS

Le Milieu king A et king b Composition king B king A Source de C et N Peptone de gélatine 20 g Glycérol 10 g Chlorure de magnésium 1,4 g Sulfate de potassium 10 g Agar (gélose) 13,6 g ED qsp 1 L Peptone de gélatine 20 g Glycérol 10 g Phosphate dipotassique 1,5 g Sulfate de magnésium 1,5 g Agar (gélose) 13,6 g ED qsp 1 L Source de C Source minérale Source minérale pH = 7,2 pH = 7,2 Lecture king A et king b King A bleu et King B vert Production des deux pigments: pyocyanine et pyoverdine King A incolore et King B vert Production de pyoverdine uniquement Le milieu reste inchangé Pas de production de pigment.

Le Milieu cetrimide pH = 7,2 Composition Peptone 20 g Molécules organiques azotées Peptone 20 g Sulfate de potassium 10 g Chlorure de magnésium 3 g Phosphate dipotassique 0,3 g Cétrimide 0,3 g Agar (gélose) 13,5 g ED qsp 1 L Sels minéraux Inhibiteur pH = 7,2 Lecture Présence de colonies sur le milieu. Les bactéries poussent en présence de cétrimide : suspicion de Pseudomonas et apparentés. Colonies bleu-vert sur la gélose. Les bactéries produisent un pigment : la pyocyanine. Suspicion de Pseudomonas aeruginosa.

Le Milieu TCBS pH = 8,6 Composition Peptone 10 g Extrait de levure 5 g Source de C et N Composition Peptone 10 g Extrait de levure 5 g Citrate de sodium 10 g Thiosulfate de sodium 10 g Chlorure de sodium 10 g Bile de bœuf 8 g Citrate ferrique 1 g Saccharose 20 g Bleu de bromothymol 0,04 g Bleu de thymol 0,04 g Agar (gélose) 13,5 g ED qsp 1 L Source de C, N, vitamines et minéraux Inhibiteur car forte concentration Source de S Source minérale, inhibiteur Inhibiteur car forte concentration Indicateur des sulfures Source glucidique © Indicateur de pH pH = 8,6

Colonies vertes  le pH est neutre ou basique . Les bactéries ne fermentent pas le saccharose : SACCHAROSE - Sans centre noir : H2S - Autres Vibrio Lecture Colonies jaune  le pH est acide . Les bactéries fermentent le saccharose en produisant des acides, virage de l’indicateur de pH du vert au jaune: SACCHAROSE + Sans centre noir : H2S – Suspicion de Vibrio cholereae Colonies avec centre noir  précipité de sulfure de fer. Les bactéries ont produit de l’H2S : H2S +