3. Réalisation d’un antibiogramme Tube La gélose est refroidie en plaçant le tube en position inclinée pour développer une surface maximale. Préparation de milieux gélosés Boîte de pétri La gélose tapisse le fond de la boîte sur une épaisseur d'environ 5 mm.
Ensemencement de bactéries sur un boîte de Pétri Réalisation d'un antibiogramme Ensemencement de bactéries sur un boîte de Pétri 2 souches bactériennes sont ensemencées : Escherichia Coli et Bacillus megatherium Pour l'ensemencement, on fabrique des râteaux en verre
Principe de l’antibiogramme Utilisation de disques de papier imprégnés d’antibiotiques L’antibiotique diffuse dans la gélose
Antibiogramme Les résultats sont lus après 16 à 18 heures d’incubation Le diamètre des zones d’inhibition révèle la sensibilité des micro-organismes http://perso.wanadoo.fr/sordalab/anticollege.htm
4. Diversité des métabolismes a) Etude du développement des bactéries dans des milieux oxygénés ou non : * A Colonies dans tout le tube : bactéries aéro-anaérobies * B Colonies en haut du tube : bactéries aérobies strictes * C Colonies en haut du tube, légèrement sous la surface : bactéries micro-aérophiles (supportent des pressions réduites en dioxygène. * D Colonies en bas du tube : bactéries anaérobies strictes Exemple de résultats
Pseudomonas aeruginosa Film bactérien uniquement en surface du tube >bactérie aérobie stricte
Escherichia coli La bactérie libère du gaz qui repousse la gélose Développement dans tout le tube >bactérie aérobie – anaérobie facultative
Enterococcus faecium Développement dans tout le tube sans faire de tapis en surface >bactérie anaérobie aérotolérante
Acidification dans les deux tubes >dégradation du glucose par voie fermentative avec production de gaz CO2 et H2 Pas d’acidification dans tube fermé Acidification en surface dans tube ouvert >dégradation du glucose par voie oxydative