en conversion leucémique. Société Algérienne D’Hématologie et de Transfusion Sanguine XIIème congrès national de la SAHTS 01 au 03 Octobre 2015 Profil phénotypique par cytométrie en flux (CMF) des Syndromes Lymphoprolifératifs Chroniques en conversion leucémique. S. Oukid, S. Taoussi, H. Brahimi, F. Lamraoui, K.M. Benlabiod, N. Rekab, Y.M. Bouchakor, C. Boucherit, M. Mezroud, C. Guezlane, M.T. Abad. Service Hématologie, EHS ELCC CAC Blida. Université de Blida I, Algérie

Introduction Les SLPC sont très hétérogènes répertoriés dans la classification actuelle de l’OMS, qui prend en compte plusieurs critères : morphologie, clinique, immunologie et génétique moléculaire.  

Introduction Le diagnostic des SLPC repose sur l’analyse : Cytologique. Immunophénotypique par CMF. Histopathologique. Cytogénétique (certains cas).

Panorama des syndromes Lymphoprolifératifs Chroniques Proliférations Lymphoides B Leucémie lymphoïde chronique classique. Leucémie Prolymphocytaire. Forme leucémique des lymphomes folliculaires. Forme leucémique des lymphomes du manteau. Leucémie à Tricholeucocytes. Lymphome splénique à lymphocytes villeux. Macroglobulinémie de Waldenström. Leucémie à plasmocytes. Proliférations Lymphoides T Leucémie / lymphome T de l'adulte. Lymphocytose à LGL. Syndrome de Sézary.

L’objectif de notre étude est de déterminer le profil phénotypique des Syndromes Lymphoprolifératifs Chroniques en conversion leucémique (SLPC) par CMF.  

Matériels et méthodes Pour chaque patient présentant un tableau évocateur d’un SLPC: Analyse cytologique. Immunophénotypage par CMF : Prélèvement sanguin sur EDTA. Panel d’anticorps monoclonaux ciblant : Les populations lymphoïdes B (CD19, CD5, CD23, CD79b, FMC7, CD22, CD10, chaines légères Kappa et Lambda, Ig….). Les populations lymphoides T. Les populations lymphoides NK.  

Les marqueurs des lignées Cellules B Cellules T Cellules NK Molécules de différenciation CD19, CD20, CD24, CD22, CD7, CD5, CD2, CD4, CD8 CD16, CD56, CD57 Récepteur à l`Ag Ig de surface (μ, δ,γ,λ,k),CD79b CD3, TCR αβ, YCRγδ. Marqueurs de sous populations CD5, CD10, FMC-7 Marqueurs d`activation CD23, CD25 HLA DR, CD25 Acquisition et l’analyse sont faites sur un cytométre en flux.

SLPC-B de type CD5+ MCL LLC LLC mixte CD19+ / CD5+ FMC7 - / + CD10 - Score 4 et 5 Score 3 et 4 MCL CD20 CD22 faible IgS CD22 moyen Igs fort CD22 fort FMC7 +++ CD10 - / + LLC LLC mixte CD23+ fort CD23- ou faible

SLPC-B de type CD5- CD20 fort CD22 fort IgS +++ FMC7 +++ CD103 - / + Score 0 CD20 +++ CD20 ++ CD22 +++ CD22 ++ FMC7 +++ FMC7 ++ CD103 ++ CD23 - CD10 - / + Score 0 Score 0 SLVL HCL PLL CD23 - / + CD22 faible IgS ++ Score 0 / 1 LF CD10 - CD10 +

SLPC - T CD16/CD56- CD4+ CD16+ CD8+ CD56 CD2/CD7+ CD16/CD56+ PROLIFERATION T MYELOME CD3+ CD3- PLL-T LGL-T LGL-NK CD16/CD56- CD4+ CD16+ CD8+ CD56 CD2/CD7+ CD16/CD56+ Marqueurs pan B CD38+++ CD138+++ Ig+++

Matériels et méthodes Les résultats sont exprimés par : Le score de Matutes. Le pourcentage de la positivité. L’intensité de la positivité des marqueurs monoclonaux.  

Marqueurs le plus souvent exprimés dans les différents syndromes lymphoprolifératifs B. CD LLC LNH du manteau LNH folliculaire LNH de la zone marginale MZL L à pro- lymphocytes LPL L à tricho- leucocytes HCL SLVL ly. villeux splenique CD19 + CD5 +(- 5%) - +/- -/+ CD22 ++ CD23 Ig +/- faible ++ forte +++ forte FMC7 +++ CD79b CD10 + (- 40%) CD25 + (- variant) CD11c CD103

CD7 + +/- - -(80%) -/+ CD2 CD5 CD3 TCRAB +(80%) TCRGD CD4 CD8 CD45 Marqueurs le plus souvent exprimés dans les différents syndromes lymphoprolifératifs T CD LNHT AB LNHT GD L+/-PL T LLTA ou HTLV1 Sézary LGL T LGL à NK CD7 + +/- - -(80%) -/+ CD2 CD5 CD3 TCRAB +(80%) TCRGD CD4 CD8 CD45 CD45 RO + OU RA+ RO+ CD25 HLA Dr CD56 CD16 CD57

Résultats Après analyse des résultats de l’immunophénotypage par CMF chez 494 cas de SLPC, nous avons retrouvé : Leucémies Lymphoïdes Chroniques (LLC) : 312 cas (63%), Leucémies à Tricholeucocytes (HCL) : 12 cas (2,5%). Syndromes Lymphoprolifératifs Chroniques en conversion leucémique (SLPC) : 170 cas (34,5%). Nous allons analyser les SLPC (170 cas) en conversion leucémique hors LLC et HCL.

Résultats Sexe : Hommes : 113 cas. Age moyen = 66,3 ans (29 - 88). Femmes : 57 cas. Sex ratio (H/F) = 1,98. Age moyen = 66,3 ans (29 - 88). Clinique : -Absence de syndrome tumoral : 12,7%. -Splénomégalie isolée : 24,7%. -Adénopathies : 62,6% + une splénomégalie : 56%. Hémogramme : - Taux moyen de GB = 62732 /µl (1900-579710). - Lymphocytose sanguine > 4000/µl : 147 cas (86,5%). - Absence d’hyperlymphocytose : 23 cas (13,5%).

Résultats Analyse cytologique a évoquée : * LLC : 71 cas (41,7%). * Autre SLPC : 99 cas (58,3%). Résultats de la CMF : - SLPC B : 157 cas (92,4%). - SLPC T : 11 cas (6,5%). - Non concluant : 02 cas (1,1%).

Répartition des SLPC selon les données de la CMF: 1er groupe : SLPC B : 157 cas (92,4%). LNH Manteau : 52 cas (33,2%). LNH de la Zone marginale : 30 cas (19%). LNH Villeux : 28 cas (17,8%). LNH Folliculaire : 14 cas (8,9%). Leucémie Pro-lymphocytaire : 06 cas (3,8%). SLPC B : 25 cas (16%). LNH Lymphocytique B : 02 cas (1,3%). (initialement atteinte ganglionnaire isolée sans hyperlymphocytose sanguine).  

Données de la CMF dans les SLPC B Score de Matutes :   Score de Matutes : - Score 0/5 : 13 cas (8,3%). - Score 1/5 : 53 cas (33,7%). - Score 2/5 : 61 cas (38,9%). - Score 3/5 : 28 cas (17,9%). - Score 5/5 : 02 cas (1,2%) (LNH Lymphocytique leucémique).

Forte expression dans les LNH Pro-lymphocytaires. Données de la CMF dans les SLPC B Expression de la monoclonalité : - Kappa : 56,3%. - Lambda : 32,5%. - Non exprimé : 11,2%. Expression de la monoclonalité selon le type du SLPC : Forte expression dans les LNH Pro-lymphocytaires. Kappa Lambda Non Exprimé Manteau 29 18 05 Zone Marginale 15 10 Villeux 16 12 Folliculaire 08 01 Pro-lymphocytaire SLPC B 14 06 Lymphocytique B

Illustration

LNH de Manteau: Gating sur CD19+, CD5+, CD79b+, Kappa+, FMC7+, CD 22+, CD20+, CD23- et CD10-.  

LNH Folliculaire : Gating CD19+, FMC7+, CD79+, Lambda+, CD10++, CD20+, CD5- et CD23-.  

LNH Zone Marginale :  Gating CD19+, Kappa+, CD79b+, FMC7+, CD20+, CD5- et CD23-.

LNH Prolymphocytaire : Gating CD19+, CD5+, CD79b+, FMC7+, CD20+, CD22+, Kappa+ et CD23-.  

2ème groupe : SLPC T

Répartition des SLPC selon les données de la CMF: 2ème groupe : SLPC T : 11 cas (6,5%). SLPC T : 05 cas. Syndrome de Sezary : 02 cas.  LPL T : 02 cas. LNH T αβ : 01 cas. LNH T γδ : 01 cas.  

LNH de Sezary : Gating CD3+, CD5+, CD2+, CD4+, TCRᾀ β+, CD45Ro+, CD7-, CD8- et CD56-.

  Commentaires 

Commentaires Nous avons comparé nos résultats à trois études Algériennes qui ont noté la prédominance des SLPC B. (1-2-3).   CAC Blida (168) CPMC (87) (2) HCA (31) (1) Oran (44) (3) SLPC B 157 (93,5%) 84 (96%) 27 (87%) 41 (93,2%) SLPC T 11 (6,5%) 03 (4%) 04 (13%) 03 (6,8%)

Commentaires   Prédominance de l’expression de la chaine légère Kappa qui rejoint la première étude de l’HCA. (1). CAC Blida (157) CPMC (64) (2) HCA (20) (1) Kappa 56,3% 29,6% 45% Lambda 32,5% 70,4% 40% Non exprimé 11,2% 15%

Commentaires  La prédominance des LNH du Manteau rejoint les deux étude de l’HCA et Oran. (1-2-3).   CAC Blida (157) CPMC (84) (2) HCA (27) (1) Oran (41) (3) LNH Manteau 52 (33%) 48 (57%) 07 (26%) 13 (32%)

Commentaires  La CMF a précisé le profil phénotypique des SLPC dans 82% des cas ; dans 18,8% des cas le classement en variétés n’a pas pu être établi ; le classement de certains de ces cas a été possible par l’approche cytogénétique. Pour les LNH du Manteau, la fréquence que nous avons présenté doit être modulée vue que nous n’avions pas analysé le CCND1; nous savons que le LNH du Manteau ne peut être affirmer que par la surexpression de la CCND1 ou par la présence de le t(11 ; 14).  

Conclusion   La CMF a été contributive dans le diagnostic des SLPC, en précisant le caractère monoclonal lymphomateux des populations typées dans la majorité des cas. L’immunophénotypage par cytométrie de flux doit être systématique devant tout syndrome lymphoprolifératif car il a un intérêt diagnostique.

Références 1- Belakehal. S. E. Apport de la cytométrie en flux dans le diagnostic et la classification des lymphomes. Thèse pour l’obtention de Doctorat en Sciences Médicales. 2008. 2- F.Harieche, N.Abdennebi, F.Boukhemia, A.Talbi, S.Akhrouf, S.Abderrahmani, F.Boumansour, H.Bouarab, S.Bellataf, L.Kouici,L.Chikhi, F.Zerhouni, R.M.Hamladji.   Caractérisation des syndromes lymphoprolifératifs chroniques en conversion leucémique par cytomètrie en flux. 3-SAIDI.D1 ; BRAHIMI.M2 ; KEHAL.S1 ; BEKADJA.MA2 ; TOUHAMI.H1 APPORT DE LA CYTOMETRIE EN FLUX AUX SYNDROMES LYMPHOPROLIFERATIFS CHRONIQUES. 1SERVICE HEMATOLOGIE CHU ORAN. 2SERVICE HEMATOLOGIE EHU ORAN.2émes journées scientifiques de BLIDA 14 Février 2010.