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Les nouveaux outils pour maitriser la mise en bouteille stérile.

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Présentation au sujet: "Les nouveaux outils pour maitriser la mise en bouteille stérile."— Transcription de la présentation:

1 Les nouveaux outils pour maitriser la mise en bouteille stérile

2 Risque de « relargage » Pollution du matériel Vin avec une forte population levurienne Filtration = réduction proportionnelle de la charge

3 La filtration de mise si élimination de 99,9999% des levures par filtration de mise levures/ml avant filtration levures /mllevures / bouteille 1000,00010, ,0010, ,017, , =début de FA 1750 Mise en bouteille stérile = levures/bouteille <10 (voir <1)

4 Adaptation du traitement de mise Adaptation du type de filtration à la population levurienne Suivi microbiologique de la mise en bouteille Risque de « relargage » Pollution du matériel Augmentation des risques de contamination du matériel Vin avec une forte population levurienne Analyses de la population levurienne par cytométrie de flux Analyse du SO2 moléculaire, libre et total = Maîtrise des risques = garantie de qualité de la mise en bouteille stérile 1 vin contaminé peu mettre en cause tout le travail dune journée Filtration = réduction proportionnelle de la charge

5 La cytométrie de flux Quoi ? Pourquoi ? Comment ?

6 Partec: linnovation en marche depuis 40 ans Principes des appareils de Cytométrie en Flux Partec: linnovation en marche depuis 40 ans Principes des appareils de Cytométrie en Flux Pascal Brunou, David Bastien Partec France La cytométrie : quoi ?

7 Agrosciences: Recherche vétérinaire Aquaculture Biologie végétale Sélection variétale Applications Industrielles: Agroalimentaire (jus de fruit, bière…) Produits cosmetiques Pharmaceutique Industrie du papier Domaines dapplications (2)

8 Analogie entre microscopie et cytométrie de fluorescence Echantillon liquide focalisé sous lobjectif et le trajet optique du cytomètre Echantillon fixe sur lame au microscope Cytométrie: = « mesure des cellules »

9 PMT 1 PMT 2 LASER Système fluidique - Focalisation hydrodynamique Cellule de mesure = cœur du système

10 Excitation par un laser des particules injectées Side Scatter (SSC) + Fluorescence Forward Scatter (FSC) Laser Source dexcitation lumineuse ultra- performante type laser pour une excitation et analyse des signaux démission en quelques microsecondes

11 Différentes approches pour le marquage des cellules Anticorps Sondes intra-cytoplasmiques Marqueurs de surface - organites cellulaires Sondes ADN

12 Configuration simple ou multi-couleurs Système Mono-paramétriqueSystème Multi-paramétrique source dexcitation simple / sources multiples

13 Représentation des résultats en 3 dimensions : * taille-structure (FSC) / activité fermentaire de la levure (Fluorescence) * Densité de population = couleur - taille-structure (FSC) - population - Activité levurienne (fluorescence) - population La cytométrie : quoi ?

14 10X 100X 1000X Zone 1Zone 2Zone 3Total Zone 1Zone 2Zone 3Total Zone 1Zone 2Zone 3Total

15 Caractéristiques de la méthode Gamme de mesure : 100 à levures/ml (sans dilution) Limite de détection : 100 à 1000 levures/ml Répétabilité : <10% de la mesure Bonne corrélation entre lactivité fermentaire de la levure et lintensité de la fluorescence mesurée

16 La cytométrie de flux, un outil qui : Permet un comptage rapide et précis Permet de connaître la viabilité et lactivité fermentaire Apporte une solution efficace pour la maitrise des mises en bouteille stériles


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