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Microbiologie Compétences Techniques. Compétences Préparation de solutions Préparation de solutions Travailler avec les concentrations Travailler avec.

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Présentation au sujet: "Microbiologie Compétences Techniques. Compétences Préparation de solutions Préparation de solutions Travailler avec les concentrations Travailler avec."— Transcription de la présentation:

1 Microbiologie Compétences Techniques

2 Compétences Préparation de solutions Préparation de solutions Travailler avec les concentrations Travailler avec les concentrations Dilutions Dilutions Dilutions en série Dilutions en série

3 Préparation des Solutions

4 Définitions Solution Solution Mélange de 2 substances ou plus dans une phase unique Mélange de 2 substances ou plus dans une phase unique Solution composée de deux composantes Solution composée de deux composantes Soluté Soluté –Partie qui est dissoute ou diluée – Habituellement la plus petite quantité Solvant (OU Diluent) Solvant (OU Diluent) –Partie de la solution dans laquelle le soluté est dissout – Habituellement le plus grand volume

5 Concentration = Quantité de soluté Quantité de solution (Pas solvant) Trois façons dexprimer les concentrations: Concentration Molaire (Molarité) Pourcentages Masse par volume Concentrations

6 Molarité N o de Moles de soluté/Litre de solution Masse de soluté/PM de soluté = Moles de soluté Moles de soluté/vol en L de solution = Molarité

7 Pourcentages Les concentrations en pourcentage peuvent être exprimé en tant que : Les concentrations en pourcentage peuvent être exprimé en tant que : V/V – volume de soluté/100 mL de solution V/V – volume de soluté/100 mL de solution M/M – Masse de soluté/ 100g de solution M/M – Masse de soluté/ 100g de solution M/V – Masse de soluté/100 mL de solution M/V – Masse de soluté/100 mL de solution Tous représentent des fractions de 100 Tous représentent des fractions de 100

8 Pourcentages (suite) %V/V %V/V Ex. 4.1L soluté/55L solution =7.5% Ex. 4.1L soluté/55L solution =7.5% Doit avoir les mêmes unités en haut et en bas! Doit avoir les mêmes unités en haut et en bas! %M/V %M/V Ex. 16g soluté/50mL solution =32% Ex. 16g soluté/50mL solution =32% Dois avoir des unités du même ordre de grandeur en haut et en bas! Dois avoir des unités du même ordre de grandeur en haut et en bas! % M/M % M/M Ex. 1.7g soluté/35g solution =4.9% Ex. 1.7g soluté/35g solution =4.9% Dois avoir les mêmes unités en haut et en bas! Dois avoir les mêmes unités en haut et en bas!

9 Masse par volume Une quantité de masse par un volume Ex. 1kg/L Connaître la différence entre une quantité et une concentration! Dans lexemple ci-dessus 1 litre contient 1kg (une quantité) – –Quelle quantité retrouverait-on dans 100ml? – –Quel est le pourcentage de cette solution?

10 Les Dilutions Réduire une Concentration Une Fraction

11 Dilutions Dilution = produire des solutions plus faibles à partir de solutions plus fortes Dilution = produire des solutions plus faibles à partir de solutions plus fortes Exemple : Faire du jus dorange à partir de concentré. Mélanger une cannette de concentré de jus dorange congelé avec trois (3) cannettes deau Exemple : Faire du jus dorange à partir de concentré. Mélanger une cannette de concentré de jus dorange congelé avec trois (3) cannettes deau

12 Dilutions (suite) Les dilutions sont exprimées comme le volume de la solution étant diluée par le volume total final de la dilution Les dilutions sont exprimées comme le volume de la solution étant diluée par le volume total final de la dilution Dans lexemple du jus dorange, la dilution serait exprimée comme 1/4, pour une cannette de jus à un TOTAL de quatre cannettes de jus dilué. Quand on parle de la dilution, vous diriez pour lexemple du jus : « un dans quatre ». Dans lexemple du jus dorange, la dilution serait exprimée comme 1/4, pour une cannette de jus à un TOTAL de quatre cannettes de jus dilué. Quand on parle de la dilution, vous diriez pour lexemple du jus : « un dans quatre ».

13 Dilutions (suite) Un autre exemple : Un autre exemple : Si vous diluez 1 ml de sérum avec 9 ml de salin, la dilution serait écrite 1/10 ou dite « un dans dix », car vous exprimez le volume de la solution étant diluée (1 ml de sérum) par le volume final TOTAL de la dilution (10 ml totaux). Si vous diluez 1 ml de sérum avec 9 ml de salin, la dilution serait écrite 1/10 ou dite « un dans dix », car vous exprimez le volume de la solution étant diluée (1 ml de sérum) par le volume final TOTAL de la dilution (10 ml totaux).

14 Dilutions (suite) Un autre exemple : Un autre exemple : Une (1) partie dacide concentré est diluée avec 100 parties deau. Le volume total de solution est 101 parties (1 partie dacide parties deau). La dilution est écrite comme 1/101 ou dite un dans cent un. Une (1) partie dacide concentré est diluée avec 100 parties deau. Le volume total de solution est 101 parties (1 partie dacide parties deau). La dilution est écrite comme 1/101 ou dite un dans cent un.

15 Dilutions (suite) Remarquez que les dilutions NONT PAS dunités (cannettes, ml, ou parties) mais sont plutôt exprimées comme un nombre par rapport à un autre nombre Remarquez que les dilutions NONT PAS dunités (cannettes, ml, ou parties) mais sont plutôt exprimées comme un nombre par rapport à un autre nombre Exemple : 1/10 ou « un dans dix» Exemple : 1/10 ou « un dans dix»

16 Dilutions (suite) Les dilutions sont toujours exprimées avec la substance originale étant diluée comme étant un (1). Si plus dune partie de la substance originale est initialement utilisée, il est nécessaire de convertir la partie de la substance originale à un (1) quand la dilution est exprimée. Les dilutions sont toujours exprimées avec la substance originale étant diluée comme étant un (1). Si plus dune partie de la substance originale est initialement utilisée, il est nécessaire de convertir la partie de la substance originale à un (1) quand la dilution est exprimée.

17 Dilutions (suite) Exemple: Deux (2) parties dun colorant sont diluées avec huit (8) parties de diluant. Le volume total de solution est 10 parties (2 parties de colorant + 8 parties de diluent). La dilution est initialement exprimée comme 2/10, mais la substance originale doit être exprimée comme étant un (1). Pour convertir le volume original à un (1), utiliser une équation de rapport et de proportion. Rappelez-vous que les dilutions sont exprimées en terme de 1 à quelque chose : __2 parties de colorant = ___1.0___ Volume total de 10 parties x Volume total de 10 parties x 2 x = 10 2 x = 10 x = 5 x = 5 La dilution est exprimée comme étant 1/5.

18 Dilutions (suite) La dilution nest pas toujours comme des nombres entiers. Exemple: Deux parties (2) de sang sont diluées avec cinq (5) parties de saline. Le volume total de solution est sept (7) parties (2 parties de sang + 5 parties de saline). La dilution serait 2/7, ou plus précisément 1/3.5. Encore une fois, ceci est calculé en utilisant une équation de rapports et de proportions. Rappelez-vous que les dilutions sont exprimées en terme de 1 à quelque chose: __2 parties de sang_____ = ___1.0___ Volume total de 7 parties x Volume total de 7 parties x 2 x = 7 2 x = 7 x = 3.5 x = 3.5 La dilution est exprimée comme 1/3.5

19 Quest que cela veut dire?? Si une solution possède une dilution de 1/10 le nombre représente 1 partie de léchantillon ajouté à 9 parties de diluant. Si une solution possède une dilution de 1/10 le nombre représente 1 partie de léchantillon ajouté à 9 parties de diluant. Donc les volumes utilisés seraient 10-1= 9. Donc les volumes utilisés seraient 10-1= 9. Ceci représente 1 partie déchantillon ajoutée à 9 parties de diluant. Ceci représente 1 partie déchantillon ajoutée à 9 parties de diluant. Comment est-ce que vous ferriez une dilution de 1/10 dans un volume final de 3 ml? Comment est-ce que vous ferriez une dilution de 1/10 dans un volume final de 3 ml?

20 Dilutions Si une dilution de 1/8 dune solution mère est faite suivie par une dilution de 1/6 quelle est la dilution finale. Si une dilution de 1/8 dune solution mère est faite suivie par une dilution de 1/6 quelle est la dilution finale. La dilution finale est: 1/8 x 1/6 = 1/48 La dilution finale est: 1/8 x 1/6 = 1/48

21 Facteur de Dilution EXEMPLE: Quel est le facteur de dilution si vous ajoutez 0.1 mL dun spécimen à 9.9 mL de diluant? EXEMPLE: Quel est le facteur de dilution si vous ajoutez 0.1 mL dun spécimen à 9.9 mL de diluant? Le volume final est égal au volume de léchantillon PLUS le volume du diluent: 0.1 mL mL = 10 mL Le volume final est égal au volume de léchantillon PLUS le volume du diluent: 0.1 mL mL = 10 mL Le facteur de dilution est égal au volume final diviser par le volume de léchantillon : 10 mL/0.1 mL = Facteur de dilution de 100X Le facteur de dilution est égal au volume final diviser par le volume de léchantillon : 10 mL/0.1 mL = Facteur de dilution de 100X

22 Exemple dun Problème Quel est le facteur de dilution quand 0.2 mL est ajouté à 3.8 mL de diluant? Quel est le facteur de dilution quand 0.2 mL est ajouté à 3.8 mL de diluant?

23 Établir le Problème Facteur de dilution = Volume final/Volume déchantillon Facteur de dilution = Volume final/Volume déchantillon = 4.0 volumes totaux = 4.0 volumes totaux 4.0/0.2 = Facteur de dilution de 20X 4.0/0.2 = Facteur de dilution de 20X

24 Dilutions Moyen de réduire une concentration Moyen de réduire une concentration Dilution: Une fraction du facteur de dilution Dilution: Une fraction du facteur de dilution Ex. Vous avez une solution de 25 mg/mL et désirez une solution de 5mg/mL Facteur de dilution = Conc. que jai Conc. que je veux Facteur de dilution = 25mg/mL 5mg/mL = 5X Dilution = 1/le facteur de dilution = 1/5 = 1 partie/5 parties Totales

25 Exemple Préparer 25mL dune solution de 2mM à partir dun stock de 0.1M Préparer 25mL dune solution de 2mM à partir dun stock de 0.1M Facteur de dilution = 100mM/2mM=50X Facteur de dilution = 100mM/2mM=50X Dilution = 1/50 parties Dilution = 1/50 parties Donc un 1/50 e de la solution doit être représenté par la solution stock Donc un 1/50 e de la solution doit être représenté par la solution stock 1/50 e de 25mL=25/50=0.5 1/50 e de 25mL=25/50=0.5 Donc = 0.5mL soluté mL solvant Donc = 0.5mL soluté mL solvant

26 Les Dilutions en Série

27 Dilutions en Série Une dilution en série est nimporte quelle dilution ou la concentration diminue par une quantité donnée dans chaque étape successive. Les dilutions sont multiplicatives.

28 Les Dilutions en Série – des Fractions en Série The fraction = The dilution –A1: 1/10 –A2: 1/4 –A3: 0.5/1.5 = 1/3 –The final dilution of the series = (A1 X A2 X A3) = 1/120 Exemple La fraction = La dilution –A1: 1/10 –A2: 1/4 –A3: 0.5/1.5 = 1/3 –La dilution finale de la série = (A1 X A2 X A3) = 1/120 1mL 0.5mL 9mL3mL 1mL

29 Dilutions Si une dilution de 1/8 dune solution mère est faite suivi par une dilution de 1/6 quelle est la dilution finale. La dilution finale est: 1/8 x 1/6 = 1/48

30 Les Dilutions en Série et sont faites en prenant une quantité donnée dune dilution initiale et de lajouter de façon successive à des tubes de diluent Rappelez-vous que les dilutions en série sont multiplicative et sont faites en prenant une quantité donnée dune dilution initiale et de lajouter de façon successive à des tubes de diluent Donc chaque dilution successive serait multipliée par le prochain facteur de dilution

31 Exemple de Dilutions en Série Tube1234 Aliquot0.2 Diluent3.8 Math 4/0.21/20x1/201/400x1/201/8000x1/20 Dilution 1/201/4001/80001/160,000

32 Exemple dun Problème Tube1234 Aliquot Diluent Math Dilution


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