AMMIQ - MAI 2010 Évaluation de la trousse EIA BinaxNow pour la détection de l’influenza pandémique A/H1N1 Sarah Brin Clément 1, Patrick Dolcé 1, Marie- Ève Hamelin 2, Guy Boivin 2, Lyne Desautels 3 et Hugues Charest 3 1 Département de microbiologie-infectiologie, CSSS Rimouski- Neigette (CSSSRN). 2 CHUQ-CHUL, Centre de recherche en infectiologie et Université Laval. 3 Laboratoire de la santé publique du Québec (LSPQ)

Introduction Détection pH1N1 Test de référence rRT-PCR (PCR Transcriptase inverse, en temps réel) LSPQ puis laboratoires désignés Absence de données sur les tests rapides EIA

Objectif de l’étude Revoir la performance EIA BinaxNow influenza A et B vs rRT-PCR pour la détection rapide de l’influenza pandémique A/H1N1 (pH1N1)

 Étude rétrospective  Période  Août 2009 à janvier 2010  Registres du laboratoire  Pas de donnée clinique  Démographie  Type de spécimen  Résultats de l’EIA BinaxNow  Résultats RT-PCR

 EIA  BinaxNow (Inverness medical)  Détection rapide Flu A/B  Performance étudiée pour grippe A/H3 et A/H1  Données du fabriquant (« package insert »)  Sensibilité 77-83%  Spécificité 97-99%  Pas de données pour pH1N1 Fait au CSSSRN

 RT-PCR en temps réel  Extraction (200µl)  EasyMag (BioMérieux)  Amplification  LC480 (Roche) 5µl d’ARN  Sonde  Taq-Man Fait par le CHUQ-CHUL et LSPQ PCR Influenza A et PCR pH1N1 (avec valeur de Ct)

 Corrélation entre les résultats EIA et RT-PCR  Stratification des Ct  <20  20 à 24  25 à 29  ≥30

Résultats  654 spécimens chez 634 patients  (280 (+) PCR FluA et 273 (+) PCR pH1N1) Ensemble des individus pH1N1 positif (654 spécimens) (273 spécimens) Moyenne d’âge : 32 ans Moyenne d’âge : 18 ans [5 jours à 98 ans] [12 jours à 75 ans] Médiane : 23 ans Médiane : 12 ans Homme : 50,2 % Homme : 53,7 % Femme : 49,8 % Femme : 46,3 % Hospitalisé : 15,4 % Hospitalisé : 9,5 %

Résultats Globaux Type de spécimen N% Naso-pharynx65199,5 Lavage alvéolaire20,3 Sécrétions bronchiques 10,2 TOTAL654100,0 Les 273 spécimens positifs pH1N1 provenaient d’échantillons naso-pharyngés (100%)

Résultats Globaux Résultats EIA No. de spécimens avec un résultat FluA Sensibilité(%)Spécificité(%) PositifNégatifTotal Positive ,598,6 Négative Total  EIA vs PCR FluA

Résultats Globaux Résultats EIA No. de spécimens avec un résultat pH1N1 Sensibilité(%)Spécificité(%) PositifNégatifTotal Positive ,498,6 Négative Total  EIA vs PCR pH1N1

Résultats Ct Flu A EIA (+)Sensibilité <2024/ % 96. 0% 20 à 24 92/119 77,3% 77,3% 25 à 29 14/88 15,9% 15,9% ≥ 30 2/41 4,9% 4,9% 5 Résultats Spécimens FluA positifs Sensibilité EIA proportionnelle à la charge virale du spécimen p<.001 TOTAL 133/280 47,5%

Résultats Ct pH1N1Sensibilité EIA (+) <20 3/3 3/3100,0% 20 à 24 64/69 64/6992,8% 25 à 29 64/126 64/12650,8% ≥ 30 1/75 1/751,3% Résultats Spécimens pH1N1 positifs Sensibilité EIA proportionnelle à la charge virale du spécimen p<.001 TOTAL 132/273 48,4%

Conclusions  Faible sensibilité (48,4%) de l’EIA pour la détection du pH1N1 dans les spécimens respiratoires  Forte spécificité du test (98,6%)  s’est donc avéré utile au CSSSRN pour l’obtention rapide de résultats  Sensibilité plus élevée quand le test est effectué sur un spécimen avec un fort inoculum  Ct <2593,1%  Ct ≥2532,3%