Anomalies moléculaires dans les LAM à caryotype normal : impact pronostique Hervé Avet-Loiseau, Laboratoire d’Hématologie CHU de Nantes

Répartition des anomalies chromosomiques Falini et al., Blood 2007;109:874-885

Anomalies FLT3 Duplications en tandem (ITD), ou mutations ponctuelles ITD:  dimérisation du récepteur  Activation constitutive

FLT3 ITD Allèle sauvage à 332 pb Allèle avec ITD

FLT3 ITD + mutations Anomalies fréquentes : ~ 30% ITD ds LAM-NK Plus rares chez l’enfant Anomalies sans doute secondaires Anomalies instables (mauvais marqueur MRD) Intérêt quantifier ratio ITD/WT ? Inhibiteurs + spécifiques (PKC-412, CEP-701,…)

FLT3 ITD / mut FLT3 Figure 3. Clinical outcome for non-APL AML patients stratified according to FLT3/ITD and FLT3/TKD status. (A) CIR and (B) OS. Mead et al., Blood 2007;110:1262-1270.

NPM1 Nucléophosmine : 5q35 Falini et al., Blood 2007;109:874-885

Mutations NPM1 Duplication 4 pb en position 956 (exon 12) Perte signal localisation nucléolaire Localisation cytoplasmique exclusive ~ 50% des LAM-NK Pronostic favorable (si FLT3 ITD neg) Marqueur intéressant pour MRD

Mutations NPM1 Allèle sauvage Allèle avec insertion

Mutations NPM1 Brown, P. et al. Blood 2007;110:979-985

Mutations CEBPA CCAAT/enhancer-binding protein a = CEBPA. 19q13 Facteur de transcription important pour granulopoièse Mutations dans parties C- et N-terminales ~ 15% des LAM-NK Gène difficile à séquencer. Pronostic favorable.

Hyperexpression ERG ERG = ETS-related gene, 21q22 220 pts, < 60 ans LAM-NK Pas d’allo Fig 2. Event-free survival (EFS) according to ERG expression levels in FLT3-internal tandem duplication (ITD)–negative patients, (B) FLT3-ITD–positive patients, (C) NPM1-mutated patients, and (D) NPM1-unmutated patients. Marcucci et al. JCO 2007;25:3337-3343.

Hyperexpression ERG Fig 3. (A) Event-free survival (EFS) and (B) disease-free survival (DFS) according to ERG expression levels in FLT3-ITD–negative/NPM1-mutated patients. Marcucci et al. JCO 2007;25:3337-3343.

Conclusions 1- De + en + de données indépendantes : validité ? 2- Analyses moléculaires : indispensables dans LAM 3- Quelle stratégie d’analyse ?

Caryotype médullaire Si Normal : FLT3 ITD et NPM1 Si FLT3 ITD neg: CEBPA, ERG, BAALC?

Conclusion 1- De + en + de données indépendantes : validité ? 2- Analyses moléculaires : indispensables dans LAM 3- Quelle stratégie d’analyse ? 4- Organisation des analyses ?

Moelle pour ADN (% blastes) Moelle pour ARN (% blastes) Moelle pour caryotype Moelle pour ADN (% blastes) PCR, séquence, µarray Moelle pour ARN (% blastes) RQ-PCR, transcriptome Plate-Formes d’Analyses Moléculaires (Nationales? Interrégionales?)