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Biopsie osseuse et histomorphométrie osseuse Docteur Marie Hélène PROUST-LAFAGE Document du Docteur Marie Hélène PROUST-LAFAGE Mise en forme web par Guy.

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1 Biopsie osseuse et histomorphométrie osseuse Docteur Marie Hélène PROUST-LAFAGE Document du Docteur Marie Hélène PROUST-LAFAGE Mise en forme web par Guy Louis MOREL Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

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3 Le prélèvement Fixation déshydratation Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

4 Inclusion dans un plastique (méthylmétacrylate) Section: microtome à lame en carbure de tungstène Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

5 Colorations Goldner Bleu de toluidine Solochrome cyanine RTRAP: ostéoclastes Alumninon Coupes blanches: UV Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

6 Lecture avec un analyseur semi-automatique Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

7 Souris: PA Erreur Autre champ Confirmer et fin de mesure Mesure Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

8 Souris: PH Erreur Autre champ Confirmer et fin de mesure Nouvelle lame et mesure Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

9 Distances, d: click-click bouton jaune (on lève le doigt en A et en B) AB d Longueurs, l: PA: Click début doigt appuyé on lève le doigt en fin de mesure AB l PH: programme humain, PA: programme animal PH: Click début doigt appuyé on lève le doigt en fin de mesure et on appuie sur le bouton vert AB l

10 La biopsie est parcourue dans sa totalité, par champs jointifs

11 Paramètres de masse BV/TV: Volume trabéculaire osseux, % Pourcentage de la surface de tissu osseux / surface de tissu BS/BV: longueur des périmètres osseux/ volume osseux Microarchitecture: Paramètres calculés à partir du BV/TV et du BS/BV Tb N : nombre de travées /mm. Tb Th: épaisseur moyenne des travées. Tb Sp: séparation moyenne des travées. Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

12 Formules : T Ar: Tissue Area: aire tissulaire totale, mm2 B Ar: Bone Area, Aire de tissu osseux, mm2 B Pm: périmètres trabéculaires totaux, mm BV/TV= B Ar/ T Area= /, % BS/ BV= B Pm/ B Ar x Tb Th= 2000/ (BS/BV) (Trab thickness, µm) Tb N= (BV/TV x 10)/ Tb Th (Trab number, / mm) Tb Sp= Tb Th x [ ( 100/BV/TV) -1] (Trab separation) Tb Th= MTPT, Tb N= MTPD, Tb Sp= MTPS Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

13 Epaisseur des corticales (PH): X 1,6, distances moyenne ds mesures pour une corticale (en µm) Corticale interne Corticale externe Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

14 BV/TV mesuré au Biocom Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

15 ColorationTrichrome de Goldner Volume ostéoide (PH) : un oculaire à 100 pts est placé devant l ’image. On clique chaque fois que l ’intersection « tombe » dans le tissu ostéoide, mesuré champ par champ. Volume ostéoide OV/BV, % Nbre de /100

16 Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

17 Mesure des surfaces: suivez le point vert = pt lumineux projeté Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

18 Mesure des surfaces de résorption Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

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21 ++=BS / =RS/BS Surfaces de résorption BS=OS/BS / Surfaces ostéoides Longueurs (click souris appuyé), données en %, mesurées champ par champ, RS et OS sont divisées à chaque champ par la densité de surface par champ (X 10) Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

22 Epaisseur ostéoïde: distances (click click) en µm (x 25) Ne se mesure pas champ par champ: moyenne de n mesures sur L’ensemble des lames pour un individu / n S Epaisseur ostéoide: O Th Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

23 Oc S BS Paramètres ostéoclastiques, longueurs (click appuyé), se mesure champ par champ, (X 10) -Surfaces ostéoclastiques: Oc S/BS, % - / BS -Nombre d ’ostéoclastes Nbre de / par 3 dénominateurs possibles: B Ar: Bone Area, mm 2 T Ar: Tissue Area, mm2 B Pm; Bone perimeter, mm

24 Mean Wall thickness: distance, en µm Ne se mesure pas champ par champ (X 10) Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

25 Nbre de j à rentrer dans l ’ordinateur -Vitesse de minéralisation Corticale (Ct) et trabéculaire (Tb) MAR, µm / jour: (X 25) moyenne de - -Surfaces simple-ment marquées: sLS / BS, % / -Surfaces doublement marquées: dLS /BS, % /  

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28 Paramètres de Formation osseuse Paramètres de Formation osseuse statiques: O Th, µm: épaisseur moyenne des liserés ostéoides OS/BS, % : Surfaces ostéoides ObS/BS, %: Surfaces ostéoblastiques OV/BV, %: Volume ostéoide MWth: mean wall thickness épaisseur moyenne du mur ostéonique Paramètres de Formation osseuse dynamiques: MAR: Mineral apposition rate, µm/j vitesse de minéralisation se mesure en trabéculaire et en cortical Surfaces minéralisantes, MS/BS, % 1/2 sLS/BS+ dLS/BS Simplement marquées: % sLS/BS Doublement marquées: % dLS/BS BFR/BS: Bone formation rate = MAR* MS/BS : Taux de Formation Osseuse (surface référent) µm 3 /µm 2 /j

29 Paramètres de Formation osseuse dynamiques Aj AR, %/ µm/j = MAR*MS/OS vitesse de minéralisation ajustée O Th/ Aj. AR = Mineralisation lag time délai de minéralisation normalement < 28 jours chez l ’homme Paramètres de formation osseuse calculés -Période d ’un cycle de remodelage (TP total period) Période de formation (FP) + période de résorption (PR)+ Période de quiescence = inervalle de temps entre le début de l ’activation d ’une unité de remodelage et le début de l ’activation de l ’unité suivante en un point donné de la travée -1/TP= Activation frequency (Fréquence d ’activation) probabilité de l ’activation d ’une nouvelle unité de remodelage en un point donné d ’une surface osseuse Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

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31 Paramètres de résorption ES/BS:%, Surfaces érodées (avec ou sans ostéoclastes) OcS/BS, %: surfaces ostéoclastiques Oc N/ B Pm (bone perimeter, /mm) ou Oc N/ BAR (Bone area/ mm2) Profondeur moyenne ou maximum des lacunes de résorption (µm) Copyright © DrMarie Hélène PROUST-LAFAGE Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

32 Importance de la mesure du Mineralisation Lag Time pour le diagnostic des formes atypiques et focales d’ostéomalacies Ostéomalacie Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE

33 Corticale d ’HPT II Corticale normale Copyright © Dr Marie Hélène PROUST-LAFAGE


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