Milieu Urée Tryptophane
BUT Milieu d’identification et de recherche de la tryptophanase ( par production d’indole), de l’uréase et de la TDA (Tryptophane Désaminase)
Composition Urée Substrat de l’uréase
Composition Tryptophane Ethanol Substrat de la TDA Solubilise le Tryptophane
Composition Rouge de Phénol Chlorure de Sodium Indicateur coloré Isotonicité du milieu Rouge (basique) et jaune (acide)
Composition KH2PO4 K2HPO4 Rôle tampon
Principe Mise en évidence de l’uréase Urée + H20 CO2 + 2 NH3 Alcalinisation du milieu visible grâce au rouge de phénol
Principe Recherche de la TDA Après ajout de Chlorure de Fer III, on obtient un produit marron foncé en présence d’acide indole pyruvique
Principe Recherche de la tryptophanase Après ajout du réactif de Kovacs, on observe un anneau rose se former en présence d’indole
Lecture & interprétation Après lecture du résultat de l’uréase, on effectue 2 tests: Réactif de Kovacks pour rechercher la production d’indole Ajout de FeCl3 pour rechercher la présence d’acide indole pyruvique
Lecture & interprétation Mise en évidence de l’uréase Résultat positif: rouge Résultat négatif: jaune Recherche de la TDA Résultat positif: marron Résultat négatif: jaune Recherche de la tryptophanase Résultat positif: jaune Résultat négatif: rose