Milieu Urée Tryptophane

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Transcription de la présentation:

Milieu Urée Tryptophane

BUT Milieu d’identification et de recherche de la tryptophanase ( par production d’indole), de l’uréase et de la TDA (Tryptophane Désaminase)

Composition Urée Substrat de l’uréase

Composition Tryptophane Ethanol Substrat de la TDA Solubilise le Tryptophane

Composition Rouge de Phénol Chlorure de Sodium Indicateur coloré Isotonicité du milieu Rouge (basique) et jaune (acide)

Composition KH2PO4 K2HPO4 Rôle tampon

Principe Mise en évidence de l’uréase Urée + H20  CO2 + 2 NH3 Alcalinisation du milieu visible grâce au rouge de phénol

Principe Recherche de la TDA Après ajout de Chlorure de Fer III, on obtient un produit marron foncé en présence d’acide indole pyruvique

Principe Recherche de la tryptophanase Après ajout du réactif de Kovacs, on observe un anneau rose se former en présence d’indole

Lecture & interprétation Après lecture du résultat de l’uréase, on effectue 2 tests: Réactif de Kovacks pour rechercher la production d’indole Ajout de FeCl3 pour rechercher la présence d’acide indole pyruvique

Lecture & interprétation Mise en évidence de l’uréase Résultat positif: rouge Résultat négatif: jaune Recherche de la TDA Résultat positif: marron Résultat négatif: jaune Recherche de la tryptophanase Résultat positif: jaune Résultat négatif: rose