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LImmunohistochimie Khennouf Lila, Langlais Valentin, Robin Laurie Université Bordeaux 2 Master 1 Neurosciences et Neuropsychopharmacologie.

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1 LImmunohistochimie Khennouf Lila, Langlais Valentin, Robin Laurie Université Bordeaux 2 Master 1 Neurosciences et Neuropsychopharmacologie

2 Tissu Traceur Anticorps Antigène Introduction

3 La Préparation des Tissus Fixation Déshydratants Agents de pontage chimique Les composés métalliques

4 La Préparation des Tissus Congélation Congélation à haute pression Congélation ultra rapide Congélation par pallier

5 Inclusion Cryoprotection La Préparation des Tissus

6 Coupe Coupes à froid Vibratome Microtomie à main La Préparation des Tissus

7 Les Anticorps Chaine légèreChaine lourde Domaines Variables Domaines constants (espèce-dépendants) VL VH CL CH VH VL CL CH

8 La Production DAnticorps Antigène Sang Préparation de la Solution In Vivo Solution dAnticorps Polyclonaux

9 La Production dAnticorps In Vivo Solution dAnticorps Monoclonaux Ganglions/rate Lymphocytes BCellules Myélomateuses Fusion Clonage In Vitro In Vitro Multiplication Sélection

10 Le Système Révélateur Les traceurs fluorescents Les traceurs enzymatiques Les traceurs métalliques

11 Tissu Immunohistochimie Directe Immunohistochimie Indirecte Les Méthodes de Marquage Anticorps Primaire Anticorps secondaire Antigène Traceur

12 Les Méthodes de Marquage Complexe avidine – biotine (ABC) Peroxydase Biotine Avidine H2O2H2O2 H2OH2O Diaminobenzidine Précipité marron

13 Les Méthodes de Marquage Marquage multiple

14 Conclusion Nombreuses étapes intermédiaires: - Perméabilisation - Blocages des sites non spécifiques - Rinçages Montage Pas un seul et unique protocole!

15 Merci de votre attention Khennouf Lila, Langlais Valentin, Robin Laurie


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