1FMPOS, Université de Bamako 2FMPOS, Université de Conakry

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1 1FMPOS, Université de Bamako 2FMPOS, Université de Conakry
Première Journée Thématique de CIDPHARMEF, Ouagadougou 09 février 2010 Evaluation de l’activité diurétique de 5 plantes utilisées dans le traitement de l’hypertension artérielle en médecine traditionnelle guinéenne Rokia Sanogo1, Drissa Diallo1 et Aliou Baldé2 1FMPOS, Université de Bamako 2FMPOS, Université de Conakry

2 Plan Introduction Objectifs Matériel et méthodes Résultats Analyses
Conclusion et perspectives

3 1. Introduction (1) L’hypertension artérielle (HTA) est un problème de santé publique En Afrique Maladie cardiovasculaire la plus commune, 36 – 44% des hospitalisations; Mortalité générale de l’adulte, 3 – 7 %; Au Mali, fréquence hospitalière, 31%; En Guinée, prévalence de l’HTA, 43,6% en milieu urbain et 14,9% en milieu rural.

4 1. Introduction (2) Large utilisation de la MT et des préparations à base de plantes. Enquêtes ethnobotaniques en Guinée. Recettes à base de plantes utilisées dans le traitement de l’HTA Evaluations ethnotérapeutiques Sélection de plantes dans la baisse de la pression artérielle. Rôle des diurétiques dans la prise en charge de l’HTA.

5 2. Objectifs Objectif général: Objectifs spécifiques:
Evaluer l’activité diurétique de 5 plantes utilisées dans le traitement de l’HTA en médecine traditionnelle guinéenne. Objectifs spécifiques: Caractériser les constituants chimiques des extraits Mettre en évidence les constituants antiradicalaires des extraits Déterminer la diurèse de base chez les souris; Evaluer les activités diurétiques et salidiurétiques des extraits

6 3. Matériel et méthodes (1)
Matériel végétal Plantes (Familles) Parties utilisées Combretum micranthum (Combretaceae) Feuilles Hymenocardia acida (Hymenocardiaceae) Paullinia pinnata (Sapindaceae) Sattaga bowel Uapaca togoensis  (Euphorbiaceae) Ecorce de tronc

7 3. Matériel et méthodes (2)
Matériel végétal 1. Combretum micranthum (CM) Diurétique, Cholagogue et cholérétique

8 3. Matériel et méthodes (3)
Matériel végétal 2. Hymenocardia acida TULL (HA) Les œdèmes, HTA, paludisme, maux de ventre, MST.

9 3. Matériel et méthodes (4)
Matériel végétal 3. Paullinia pinnata  (PP) Les racines, feuilles et graines : diurétiques, les plaies, abcès, paludisme, fièvre jaune, diarrhée et l’ictère. Les feuilles : cardiotoniques émétiques, laxatives et utilisées aussi contre la dysenterie, colique, dartre, carie dentaire, fièvre et vertiges. Les rameaux + feuilles : cardiotoniques, contre hypertension, rhumatisme et vomissement.

10 3. Matériel et méthodes (5)
Matériel végétal 4. Uapaca togoensis (UT) Ecorces contre l’ictère, Rameaux contre le furoncle et pour la fertilité féminine, Feuilles contre la fatigue. 5. Sattaga bowel (SB)

11 3. Matériel et méthodes (6)
Préparation des Extraits hydroalcooliques à 20% : 2 g de poudre ml (Ethanol à 30°et 70°) Macération pendant 30 min, Filtration. CCM (10 extraits) Activité diurétique (5 extraits EtOH 30°)

12 3. Matériel et méthodes (7)
Chromatographie sur couche mince (CCM) Support : Plaque de silice 60GF 254, d’épaisseur 0,25 mm Dépôt : 10l Système de solvants : BAW = Butanol : Acide acétique : Eau (60 :15 :25) Acétate d’Ethyle : Méthanol : Eau  (100: 13,5 :4) Front de solvant : 10 cm. Observation: UV à 254 nm et à 366 nm. Révélateurs: Réactifs de Godin (Polyvalents), Anisaldéhyde (stérols et triterpènes, génines de saponosides), FeCl3 (substances polyphénoliques); DPPH: 1,1’diphényl-2 picryhydrazyle (Constituants antiradicalaires). Calcul du facteur de rétention (Rf).

13 3. Matériel et méthodes (8)
Extraits extemporanés: Infusés : Hymenocardia acida à 21% Sattaga bowel 15% Uapaca togoensis 15% Décoctés : Combretum micranthum à 10 % (CM1) Combretum micranthum (Hépatisane à 2%) (CM2) Paullinia pinnata à 21%. Evaluation de activité diurétique et salidiurétique

14 3. Matériel et méthodes (9)
Matériel animal Souris blanches mâle et femelle, de souche OF1, Poids: 22 à 40 g. 10 lots de 5 souris. Jeûne de 18h, accès libre à l’eau

15 3. Matériel et méthodes (10)
Cage métabolique, 3600M021 (Ugo Basile, Italie)

16 3. Matériel et méthodes (11)
Détermination de la diurèse de base Lot de 5 souris  Sans surcharge hydrique Avec surcharge hydrique (50ml/kg). Recueil de l’urine pendant 6h

17 3. Matériel et méthodes (12)
Détermination de l’activité diurétique (Colot 1972). Principe : Mesure de l’excrétion urinaire chez les souris mise en surcharge saline. Lots traités: Lot témoin, eau distillée (25 ml /Kg) Lot Furosémide (20 mg dans 25 ml/Kg) Lots extraits secs ETOH à 30° dose/kg dans 25 ml Extraits extemporanés liquides des 5 plantes (25 ml /Kg)

18 3. Matériel et méthodes (13)
Détermination de l’activité diurétique (Colot 1972) Mode opératoire : 1. Administration des traitements: Extraits EtOH sec et aqueux extemporanés, Furosémide et Eau distillée. 2. Surcharge saline (solution de NaCl à 1,8 % à 50 ml/kg) 3. Mise des 5 souris d’un même lot dans la cage métabolique 4. Paramètres notés : Temps de la première miction Volume d’urine excrété par heure pendant 6h pH de l’urine Concentrations urinaires des ions sodium et potassium.

19 3. Matériel et méthodes (14)
Estimation de l’activité diurétique selon Kau et coll. 1984: Excrétion urinaire volumétrique (E.U.V) = (VE/VA) x 100 VA = volume administré et VE = volume excrété. EUV < 80% = activité antidiurétique ; EUV comprise entre % = Pas d’activité ; EUV comprise entre % = Faible activité ; EUV comprise entre % = Modeste activité; EUV > 150% = Importante activité. Action diurétique selon Howlader et coll. 2006: EUV traité/ EUV Témoin NaCl,

20 3. Matériel et méthodes (15)
Détermination de l’activité salidiurétique (Colot 1972). Principe : Effet d’un diurétique sur la natriurie et la kaliurie chez les animaux mis en surcharge hydrique. Lots traités: Lot témoin, eau distillée (25 ml /Kg) Extraits extemporanés liquides des plantes à activité diurétique (25 ml /Kg) Lot Furosémide (20 mg dans 25 ml/Kg) Mode opératoire : Administration des traitements Surcharge hydrique (Eau distillée à 50ml/kg). Mise des 5 souris du même lot dans la cage métabolique Paramètres notés : Volume d’urine pendant 4 heures. Détermination de la concentrations des ions sodium et potassium. Activité salidiurétique a été exprimée comme rapport Na+ / K+.

21 4. Résultats (1) Constituants chimiques et antiradicalaires
Anisaldéhyde Godin FeCl3 DPPH

22 4. Résultats (2) Constituants chimiques et antiradicalaires
Godin DPPH Sattaga bowel  (SB) Uapaga togoensis (UT) Hymenocardia acida (HA) Paullinia pinnata (PP) Combretum micranthum (CM) FeCl3

23 4. Résultats (3) Tableau N°1: Comparaison des volumes urinaires
Lots de 5 souris Volumes en 6h Diurèse de base sans surcharge hydrique 1,60 à 3,75 ml Diurèse de base avec surcharge hydrique 6,36 à 8,70 ml Diurèse sous surcharge saline sans traitements 6,95 à 8,50 ml Diurèse sous surcharge saline + traitements 7,75 à 16,70 ml

24 Activité diurétique des extraits EtOH 30°
4. Résultats (4) Activité diurétique des extraits EtOH 30° Traitements TPM en min EUV en % (Estimation) Témoin NaCl 46 106,50 (Pas d’activité) CM 69 mg/kg 49,32 (Antidiurétique) HA 53 mg/kg 40 94,78 (Pas d’activité) PP 54 mg/kg 35 167,49 (Importante activité) SB 41 mg/kg 44 137,32 (Modeste activité ) UT 43 mg/kg 34 95,61(Pas d’activité)

25 Volume d’excrétion urinaire dans le temps Valeurs exprimées en ml
4. Résultats (5) Tableau N°2: Effets diurétique des extraits extemporanés Lots Volume d’excrétion urinaire dans le temps Valeurs exprimées en ml 1h 2h 3h 4h 5h 6h TEau 0,50 4,60 6,00 7,70 8,10 8,70 TNaCl 2,50 3,50 5,40 6,40 6,95 Dec.CM1ns 2,00 7,75 8,75 9,25 9,50 Dec.CM2* 2,60 9,10 10,56 11,88 11,95 Inf. HA* 1,20 8,76 11,75 12,25 13,50 Déc. PP ns 3,40 5,50 7,50 Inf SB ns 1,63 5,00 9,69 11,20 11,40 Infusé UT 3,15 10,63 12,10 Furos** 11,50 15,50 16,50 16,70

26 4. Résultats (6)

27 4. Résultats (7)

28 4. Résultats (8)

29 4. Résultats (9)

30 4. Résultats (10)

31 4. Résultats (11)

32 Lots traités avec 25 ml/kg
4. Résultats (12) Lots traités avec 25 ml/kg EUV % Action diurétique* Témoin NaCl 107,58 --- Infusé SB à 15% 171,42 1,58 CM 1 à 30% 106,98 0,99 CM 2 à 2% 133,81 1,24 HA à 21% 198,82 1,84 UT à 15% 155,35 1,44 PP à 21% 099,74 0,92 Furosémide 20mg/kg 199,52 1,85

33 4. Résultats (13) Lots/doses TPM min pH Na+ K+ Témoin eau , Témoin NaCl , Infusé SB , Déc.CM , Infusé HA , Infusé UT , Déc.té PP 42 6, Furosémide ,

34 4. Résultats (14) Activité salidiurétique des extraits extemporanés de 4 plantes et du Furosémide Lots /25 ml/kg VE/4h Na+ K+ Na+/K+ Témoin eau 4, ,95 Déc. CM à 2% 4, ,42 Infusé HA à 21% 9, ,18 Infusé SB à 15% 7, ,33 Infusé UT à 15% 8, ,00 Furosémide 20mg/kg 10, ,95

35 5. Analyses (1) 1. Constituants anti-DPPH
Dans tous les extraits des EtOH 30° et 70° 2. Avec les extraits EtOH 30° sec aux doses testées Pas d’activité diurétique, sauf avec Paullinia pinnata et Sattaga bowel. 3. Avec les extraits extemporanés : Elimination d’urine importante dans les 2 1ères heures pour Combretum micranthum. Activité diurétique importante de Sattaga bowel, de Hymenocardia acida  et de Uapaga togoensis.

36 5. Analyses (2) Meilleure activité diurétique avec le décocté dilué de Combretum micranthum Premières mictions rapides avec Sattaga bowel Faible activité salidiurétique de Sattaga bowel et de Hymenocardia acida par rapport au Furosémide.

37 Récapitulatif Scores 18 17 10 16 Résultats CM HA PP SB UT 1 Anti-DPPH
5 3 2 4 1 2. Activité diurétique ETOH - Ext H2O TPM Elim 2ème h Elimination NA+ Comparable Furosémide 3. Activité salidiurétique Scores 18 17 10 16

38 6. Conclusion et perspectives (1)
Les extraits les plus actifs ont été: Hydroalcooliques Paullinia pinnata Sattaga bowel. Aqueux extemporanés Combretum micranthum Hymenocardia acida Sattaga bowel

39 6. Conclusion et perspectives (2)
Etudier la relation dose – effet des extraits extemporanés et hydroalcooliques; Procéder à un fractionnement bioguidé afin d’identifier les fractions riches en constituants anti-DPPH et à activités diurétiques et salidiurétiques.

40 6. Conclusion et perspectives (3)
Renforcement du plateau technique Cages métaboliques pH mètre Photomètre de flamme Kits de dosage d’autres paramètres Plaques de CCM

41 7. Remerciements Prof. Aliou Baldé, pour la confiance
Prof. Flabou Bougoudogo et Prof. Drissa Diallo pour l’accueil de l’étudiante au DMT de l’INRSP. CIDPHARMEF, pour m’avoir permis de participer à cette journée.