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Comment obtenir une tomate résistante à lécrasement?

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Présentation au sujet: "Comment obtenir une tomate résistante à lécrasement?"— Transcription de la présentation:

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2 Comment obtenir une tomate résistante à lécrasement?

3 Avant de répondre à la question, sache que lenzyme polygalacturonase (PG) joue un rôle dans la sensibilité des tomates à lécrasement. Si on diminue la quantité de cette enzyme dans les cellules de tomates, celles-ci seraient plus résistantes. Mais comment faire? Nous allons voir plus loin toutes les étapes qui mènent à la production des tomates résistantes à lécrasement.

4 Il faut diminuer la quantité de PG dans les cellules en inhibant son gène par son ARN anti-sens. = ARN PG anti-sens Étape 1 Cloner lARN anti-sens de la PG dans le MSC. Vecteur binaire

5 Sais-tu comment transférer le vecteur binaire dans les cellules de tomates? Lintroduire directement dans Agrobacterium? En fait, non! Il faut passer par la bactérie E.coli qui nous sert dintermédiaire. Sais-tu comment sappelle la technique utilisée pour ça? ???

6 Étape 2 On transfert le vecteur binaire dans la bactérie E.coli par trans- formation. Transformation Bactérie E.coli

7 Sais-tu comment on fait la sélection des bactéries E.coli transformées? Pousser les bactéries sur un milieu avec un antibiotique? Et oui! Le vecteur binaire possède un gène de résistance à un antibiotique et seulement les bactéries transformées seront résistantes. Sélectionner le gène par PCR?

8 Étape 3 Transfert du vecteur binaire de E.coli vers Agrobacterium par la conjugaison entre les deux bactéries. Et cest la bactérie Agrobacterium qui transfert le vecteur dans les cellules de plantes…

9 Étape 4 Découper une feuille dun plant de tomate et déposer les morceaux dans un pétri dagar nutritif. Étape 5 Ensuite, on infecte ces cellules avec une solution contenant Agrobacterium. Les cellules brisées par le découpage se dédifférencient et redeviennent des cellules embryonnaires. Merci!!! Mais comment fonctionne le gène anti-sens?

10 Gène PG anti-sens Gène PG normal ARN PG anti-sens ARN PG normal LARN PG anti-sens shybride avec lARN PG naturel pour ainsi bloquer la traduction et donc empêcher la synthèse des protéines PG. Et comme il ny a plus de protéine PG, les tomates transgéniques sont maintenant résistante à lécrasement!

11 ??? Malheureusement, les tomates transgéniques ne sont pas plus résistantes à lécrasement. Et vous, savez vous pourquoi??? Sais-tu pourquoi? ???

12 Toutefois, les cellules expriment bien lARN anti-sens et il y a moins de protéines PG formées. Mais la PG nest sans doute pas la seule enzyme impliquée dans le processus de mûrissement.

13 Vous saviez quAgrobacterium est grandement utilisée en biotechnologie? Résistance aux insectes Résistance aux virus Manipulation génétique des pigments Résistance aux herbicides Autres …

14 Stéphanie Roy Cours EDU 7492 UQAM 18 octobre 2003


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