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Chabaud-Francioni Sarah Manent Laurie-Anne Roland Jérémy.

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1 Chabaud-Francioni Sarah Manent Laurie-Anne Roland Jérémy

2 Introduction I) La viabilité et la notion de quiescence des cellules satellites dans les tissus post mortem II) Les caractéristiques moléculaires du métabolisme des cellules satellites post-mortem III) Le potentiel de greffe des cellules post- mortem Conclusion et discussion

3 Quelques définitions: Cellules satellite: cellules souches situées en périphérie des cellules musculaires. Ces cellules sont généralement quiescentes, mais lors d'une lésion musculaire, ces cellules sont capables de proliférer, puis de se différencier en cellules musculaires. Certaines cellules restent indifférenciées et reconstituent ainsi le stock de cellules satellites. Myoblaste: cellules satellites rentrées déjà en différenciation responsables de la formation des myotubes. Myotube: étape de développement d'une fibre musculaire composé d'un syncytium formé par fusion de myoblastes. Syncytium: région du cytoplasme contenant plusieurs noyaux. Lintérêt et les limites des cellules souches pour la recherche: Espoir pour la médecine Difficile a manipuler Difficile à isoler Stock limité de cellules souches Avantage des cellules souches provenant de tissus post mortem

4 Comment les cellules souches évoluent après la mort?

5 Histologie Etude des tissus Myotubes in vitro après 14 jours de culture

6 Comment les cellules souches évoluent après la mort? Les tissus musculaires sont altérés mais les cellules satellites sont présentes et font leur travail cest-à-dire réparer les tissus abimés. Comment évolue la quantité de cellules souches dans les tissus post mortem?

7 Enumération des cellules satellites viables par FACS Evaluation du nombre de cellules satellites par rapport au autres types cellulaires

8 Comment les cellules souches évoluent après la mort? Les tissus musculaires sont altérés mais les cellules squelettiques sont présentes et font leur travail cest-à- dire réparer les tissus abimés. Comment évolue la quantité de cellules souches dans les tissus post mortem? La proportion de cellules souches par rapport aux autres types cellulaire augmente de 1,7 fois. Sous quel état physique sont les cellules souches dans les tissus post mortem?

9 Capacité des cellules souches à former des colonies Evaluation du temps auquel se passe la première mitose Observation du comportement des cellules face aux maladies. Rappel: Contrôle: 75% de cellules satellites

10 Comment les cellules souches évoluent après la mort? Les tissus musculaires sont altérés mais les cellules squelettiques sont présentes et font leur travail cest-à- dire réparer les tissus abimés. Comment évolue la quantité de cellules souches dans les tissus post mortem? La proportion de cellules souches par rapport aux autres types cellulaire augmente de 1,7 fois. Sous quel état physique sont les cellules souches dans les tissus post mortem? Les cellules satellites sont dans un état de quiescence dans les tissus post mortem leur permettant de survivre.

11 Quel est le métabolisme des cellules satellites post mortem ?

12 l) ROS augmente k) Etat rédox quasi similaire (NAD/NA DH) i) Diminution de la consommation doxygène (O2)

13 Quel est le métabolisme des cellules satellites post mortem ? Elles sont dans un état métabolique faible: consommant moins dO2 donc produisant moins dATP. Et en débit dune hausse des niveaux de ROS leur états rédox restent faibles. Comment les cellules satellites post-mortem réagissent elles face à des conditions drastiques?

14 Les cellules souches vivent mieux en anoxie!!! Les cellules souches vivent mieux en anoxie!!! d) Diminution de ROS e) Hors anoxie, diminution de la masse mitochondriale

15 Quel est le métabolisme des cellules satellites post mortem ? Elles sont dans un état métabolique faible: consommant moins dO2 donc produisant moins dATP. Et en débit dune hausse des niveaux de ROS leur états rédox restent faibles. Comment les cellules satellites post-mortem réagissent elles face à des conditions drastiques? Il semblerait que les cellules satellites post-mortem vivent mieux en état danoxie. Quel sont les états des mitochondries des cellules satellites post-mortem?

16 B et C) Vues microscopes de cellules satellites musculaires capacité à se différencier sans O2

17 Quels rôles ont les cellules souches dans lengagement myogénique? Et quelles sont leur état métabolique? Elles sont dans un état métabolique faible: consommant moins dO2 donc produisant moins dATP. Et en débit dune hausse des niveaux de ROS leur états rédox restent faibles. Comment les cellules satellites post-mortem réagissent elles face à des conditions drastiques? Il semblerait que les cellules satellites post-mortem vivent mieux en état danoxie. Quel sont les états des mitochondries des cellules satellites post-mortem? LADN mitochondrial augmente hors anoxie et diminue en condition anoxique. Même si on modifie et on imite les conditions environnemental, les comportements des cellules satellites post-mortem ne sont pas égales dans des conditions similaires…

18 Quelles conditions sont les plus favorables pour une transplantation de cellules souches musculaires? Temps de prélèvement post- mortem et taux doxygène

19 Le nombre de fibres dérivant de cellules transplantés est équivalent dans toutes les conditions Le nombre de capillaires autour des myofibres est également similaire

20 Quelles conditions sont les plus favorables pour une transplantation de cellules souches musculaires? Temps de prélèvement pm et taux doxygène Le nombre des fibres en régénération et de capillaires autour de celles-ci dans les différentes conditions est équivalent. Il ny a pas de différences signifiantes pour conclure un milieu plus favorable. Est-ce que cette régénération vu sur lexemple de la cellule souche musculaire est extensible à dautres types de tissus? Exemple des cellules souches hématopoïétiques

21 Que ce soit en milieu anoxique ou non, tous les animaux sont viables avec 100% de chimérisme

22 Quelles conditions sont les plus favorables pour une transplantation de cellules souches musculaires? Temps de prélèvement pm et taux doxygène Le nombre des fibres en régénération et de capillaires autour de celles-ci dans les différentes conditions est équivalent. Il ny a pas de différences signifiantes pour conclure à un milieu plus favorable. Est-ce que cette régénération vu sur lexemple de la cellule souche musculaire est extensible à dautres types de tissus? Exemple des cellules souches hématopoïétiques Oui, nous pouvons étendre nos résultats à dautres types cellulaires, ce qui pourrait nous permettre de collecter un grand nombre de type de cellules souches de différents tissus.

23 Les cellules souches musculaires après la mort entre dans un état de quiescence qui leur permet de survivre et de garder leur propriété indifférenciée. Dans des milieux de vies raisonnables (cellules souches prélevées pm de 0 à 4 jours, en milieu anoxique ou non), et pour une variété importante de tissus, les cellules souches peuvent permettre la régénération après transplantation

24 Les cellules souches utilisés pour les expérimentations viennent de patients allant de 57 à 95 ans : les expériences peuvent-elles être faussé par de tels écarts dâges ? Dun point de vue éthique, ces cellules souches ne pausent pas de problèmes spéciaux. La diversité des cellules souches pouvant être obtenue représentent un énorme potentiel de cellules utilisables en médecine et en recherche.

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