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R ECHERCHE DE LA THERMONUCLÉASE Staphylococcus aureusTest didentification de Staphylococcus aureus.

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1 R ECHERCHE DE LA THERMONUCLÉASE Staphylococcus aureusTest didentification de Staphylococcus aureus

2 SOMMAIRE 1.But 2.Composition 3.Principe 4.Utilisation 5.Lecture

3 B UT La thermonucléase est une enzyme spécifique que seules quelques espèce bactériennes possèdent. Ce test est donc un test didentification de lespèce pathogène Staphylococcus aureus. Cest donc un test fondamental pour identifier S.aureus mais il faut compléter ce test dindentification par dautres tests : recherche de la protéine A, recherche de la coagulase libre, etc.

4 C OMPOSITION DU MILIEU POUR LA RECHERCHE ADN Bleu de toluidine Chlorure de calcium Chlorure de sodium Agar Tampon TRIS pH:9 Ce « milieu » ne permet pas la croissance des bactéries !!!

5 PRINCIPE Il suffit de mettre la bactérie portée 10 minutes à 100°C en présence du substrat de lenzyme : lADN ainsi que dun indicateur dADN : le bleu de toluidine Si la bactérie possède la thermonucléase : lenzyme résiste à la chaleur lenzyme dépolymérise lADN en nucléotides ce qui fait virer au rose le bleu de toluidine.

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7 U TILISATION Réaliser des puits réguliers Réaliser un repérage des dépôts sur les tranches de la boîte de Pétri Déposer la suspension bactérienne de façon suffisante (ne pas déborder!!!) Dans le cas dun test de recherche de thermonucléase, test le plus souvent réalisé, il faudra appliquer un traitement thermique à la suspension bactérienne. Incuber 24h, 37°C, NE PAS RETOURNER LA BOITE Lire

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10 FIN bon courage à vous!!!


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