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Le test E.L.I.S.A. est un test immunologique ; il permet de détecter des anticorps sécrétés en réponse à une infection. Il est utilisé pour le dépistage.

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1 Le test E.L.I.S.A. est un test immunologique ; il permet de détecter des anticorps sécrétés en réponse à une infection. Il est utilisé pour le dépistage du SIDA avec un second test de confirmation par immuno-transfert (Western-blot)

2 Nous allons détecter la présence danticorps anti-BSA ( Bovine sérum albumine) dans le sérum dun lapin

3 La première étape : le « cotting » a été réalisée par le fournisseur; il sagit de tapisser le fond des puits avec la BSA par effet électrostatique

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5 Deuxième étape:on verse ensuite deux gouttes du sérum à tester dans le puits

6 On verse ensuite deux gouttes du sérum à tester dans le puits

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8 Si le lapin est « contaminé », son sérum possède des anticorps anti-BSA

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10 Ces anticorps anti-BSA viennent se fixer sur la BSA qui tapisse le fond du puits.

11 Ces anticorps anti-BSA viennent se fixer sur la BSA qui tapisse le fond du puits. On vide ensuite le puits dun geste rapide.

12 Puis le puits est lavé avec une solution tampon twin pour enlever les quelques anticorps non fixés.

13 Troisième étape: on verse lanticorps de détection. Il est couplé à une enzyme: la péroxydase.

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15 Les anticorps de détection se fixent aux anticorps anti- BSA.

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17 Le puits est vidé et lavé deux fois avec le tampon twin

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19 Quatrième étape: On verse dans le puits la solution révélatrice contenant le substrat de la péroxydase: le TMB ( tétra-méthyl-benzidine).

20 Le TMB se colore en bleu en présence de lenzyme

21 La coloration bleue indique donc la présence danticorps anti BSA. Lintensité de la coloration est proportionnelle à la concentration danticorps anti-BSA ; cette méthode permet donc un dosage par colorimétrie


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