La présentation est en train de télécharger. S'il vous plaît, attendez

La présentation est en train de télécharger. S'il vous plaît, attendez

Le lapin Apo AI transgénique Les lapins transgéniques utilisés comme modèle pour létude de lathérosclérose Antoine VENDE Laura MASSON L2-UCO 2012/2013.

Présentations similaires


Présentation au sujet: "Le lapin Apo AI transgénique Les lapins transgéniques utilisés comme modèle pour létude de lathérosclérose Antoine VENDE Laura MASSON L2-UCO 2012/2013."— Transcription de la présentation:

1 Le lapin Apo AI transgénique Les lapins transgéniques utilisés comme modèle pour létude de lathérosclérose Antoine VENDE Laura MASSON L2-UCO 2012/2013

2 Le lapin Apo AI transgénique Problématiques: - Quel est lintérêt du lapin transgénique ? - Pourquoi sest-on intéressé au lapin Watanabe ? - Pourquoi le gène humain inséré dans le lapin est-il intéressant ?

3 Le lapin Apo AI transgénique I- Introduction II- Explication du métabolisme lipidique et de la maladie de lathérosclérose III- Apolipoprotéine AI IV - Obtention de lOGM V- Avantages et inconvénients VI- Conclusion

4 Animaux transgéniques pour létude de maladies humaines Modèle détude de maladies humaines Lapin - Fonctions biologiques proches de lhomme - Lapins transgéniques exprimant des gènes humains pour létude de lathérosclérose. But: - Mieux comprendre les processus de lathérosclérose - Tester de nouvelles substances pharmacologiques I-Introduction

5 Pourquoi le lapin comme modèle animal ? Sa taille Courte durée de gestation Sensible à l'introduction de lipides dans son alimentation => hypercholestérolémie Grand nombre dembryons. I-Introduction

6 Lapin néo- zélandais transgénèse Lapin Apo AI transgénique néo-zélandais Lapin Watanabe I-Introduction

7 II- Explication du métabolisme et de la maladie => Cholestérol Le cholestérol est indispensable pour les cellules => synthèse de leur membrane Le transport du cholestérol => lipoprotéines : -les LDL = « mauvais cholestérol » -les HDL, = « bon cholestérol » UN seul cholestérol mais 2 systèmes de transport

8 Si trop de LDL => dépôt sur paroi des artères => création de plaques dathéromes CELLULE MUSCULAIRE LDL Artère II- Explication du métabolisme et de la maladie => Cholestérol

9 Mécanisme de formation des plaques dathérome Infiltration des artères par les LDL Recrutement des monocytes et inflammation

10 II- Explication du métabolisme et de la maladie =>Lathérosclérose Dépôts lipidiques => plaques dathéromes Réduisent le diamètre de lartère Dépôts => obstruction des vaisseaux La formation de ces plaques est complexe Déclenchée par l'augmentation du cholestérol (Davies MJ et al, Circulation 1996)

11 II- Explication du métabolisme et de la maladie =>Lhypercholestérolémie familiale Maladie héréditaire Engendre lathérosclérose: Hypercholestérolémie Mutation du gène du récepteur des LDL Lapin Watanabe: modèle animale ayant la même mutation: il est déficient en récepteur LDL

12 LDL personne saine foie Récepteur LDL Explication de lhypercholestérolémie héréditaire

13 LDL personne malade foie Récepteur LDL Explication de lhypercholestérolémie héréditaire Récepteur muté LDL

14 III- Apolipoprotéine AI Apo AI = Apolipoprotéine AI : constituant les HDL Schéma de HDL Apo AI

15 28 lapines Néo-Zealandaises 16 lapines en stade superovulation Extraction des embryons Fécondation avec des mâles de même race Sélection de 5OO embryons. Injection dune hormone FSH IV - Obtention de lOGM: GENERATION DES LAPINS TRANSGENIQUES Au microscope

16 Banque d'ADN chromosomique humain: fragments construits dans des bactériophages Criblage par hybridation avec une sonde d'ADN complémentaire de lApo AI humaine. Digestion par enzyme de restriction: EcoRI et BamHI EcoRI Bam HI Récupération du fragment Apo AI sur gel dagarose IV - Obtention de lOGM: PREPARATION DU FRAGMENT GENOMIQUE D'APO-Al

17 EMBRYON LAPIN Micro-injection du gène humain Apo AI dans le pronucléus mâle IV - Obtention de lOGM: GENERATION DES LAPINS TRANSGENIQUES EMBRYON LAPIN Micro-injecté introduction des embryons dans 24 lapines en état de pseudo-gestation 41 lapereaux

18 IV - Obtention de lOGM: Identification des transgéniques Extraction dADN à partir d'un fragment de queue prélevé sur chaque lapereau Analyse par PCR de la présence du gène Apo AI 6 lapereaux transgéniques sur 41

19 IV - Obtention de lOGM: CONTROLE DE L'EXPRESSION DE L'APOLIPOPROTEINE A-I HUMAINE DANS LE PLASMA DES LAPINS TRANSGENIQUES Taux de cholestérol dans laorte témoin transgénique % de la plaque Lipidique à la surface de laorte témoin transgénique Concentration Apo AI témoin transgénique

20 foie LDL artère HDL Intérêt des HDL pour baisser le taux de cholestérol et diminuer lathérosclérose

21 Diminution du taux de cholestérol dans laorte Lapin Watanabe Lapin Apo AI transgénique néo-zélandais Lapin Apo AI transgénique Watanabe croisement Déficient en R-LDL = modèle pour lhypercholestérolémie IV - Obtention de lOGM: obtention dun 2 éme OGM par croisement

22 V- Avantages et inconvénients Les avantages: Comprendre le métabolisme lipidique et athérosclérose Créer et tester de nouvelles substances pharmacologiques Etude gène => organisme entier Le lapin transgénique permet dobtenir un modèle + varié et + pertinent

23 V- Avantages et inconvénients Problèmes posés par les animaux transgéniques: Biosécurité coût élevé dobtention OGM gaspillage danimaux Bien être des animaux Brevetage et profits

24 VI- Conclusion Le lapin transgénique => bon modèle pour létude de lathérosclérose => Lutilisation de lapins transgéniques est important dans la recherche médicale

25 Bibliographie Livres OGM tout sexplique, de Christian Vélot Les animaux transgéniques, de Louis-Marie Houdebine Publication Dyslipoproteinaemia-sensitized transgenic rabbit, de Benoit et al. Sites internet recherche.gouv.fr/file/_Commission_de_Genie_Genetique_/59/ 7/guide_ pdf recherche.gouv.fr/file/_Commission_de_Genie_Genetique_/59/ 7/guide_ pdf


Télécharger ppt "Le lapin Apo AI transgénique Les lapins transgéniques utilisés comme modèle pour létude de lathérosclérose Antoine VENDE Laura MASSON L2-UCO 2012/2013."

Présentations similaires


Annonces Google