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ADN mutant circulant pour évaluer une dynamique de tumeur Olivier SAULNIER & Sabrina VARLET Article publié par Frank DIEHL et al. dans « Nature medicine»

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Présentation au sujet: "ADN mutant circulant pour évaluer une dynamique de tumeur Olivier SAULNIER & Sabrina VARLET Article publié par Frank DIEHL et al. dans « Nature medicine»"— Transcription de la présentation:

1 ADN mutant circulant pour évaluer une dynamique de tumeur Olivier SAULNIER & Sabrina VARLET Article publié par Frank DIEHL et al. dans « Nature medicine» en 2008 Licence professionnelle de Génomique Année 2012 –

2 Plan de présentation Introduction Objectifs Les méthodes de pré-diagnostic dun cancer colorectal (CCR) - Antigène carcino-embryonnaire (ACE) - ADN tumoral circulant (ADNct) Résultats Discussions / Perspectives 2

3 Quest-ce quun cancer ? Altération des gènes qui contrôlent la division cellulaire Division infinie non ordonnée 70% des personnes atteintes dun cancer ont une rechute dans les 2 ans qui suivent le traitement Anti Anti-oncogène = freine la division cellulaire Proto-oncogène = stimule la division cellulaire 3

4 Objectifs Diagnostiquer au plus tôt un cancer Détecter rapidement une récidive 4

5 Antigène carcino-embryonnaire (ACE) Glycoprotéine présente en faible quantité chez ladulte Bio-marqueur standard Valeur anormale : [ACE] > 5ng/mL Examens complémentaires nécessaires 5

6 ADN tumoral circulant (ADNct) Surveiller la dynamique de la tumeur ADN tumoral circulant 0,01% ADN circulant total Proportionnel au développement de la tumeur Bio-marqueur spécifique (séquence dépendante) 6

7 Comparaison ACE / ADN ct 7

8 Principe général de létude 8 Quantité dADN circulant totale Pourcentage dADN mutant Quantité dADN circulant mutant = X

9 Principe BEAMing pré Amplification PCR en émulsion Hybridation Purification (aimant) Cytométrie en flux 9 Huile/émulsifiant

10 Résultats BEAMing 10 day 0day 3 day 48 day 244 Pourcentage dADN mutant circulant (sujet 6) Temps (jours) (%) chirurgie ADNct diminue après chirurgie Récurrence de la maladie malgré lablation de la tumeur Sauvage Mutant Sauvage/ Mutant

11 Conclusion Avantages :- Spécifique - Analyse fine/sensible - Évaluer la taille de la tumeur Inconvénients :- Développer un marqueur par sujet - Temps danalyse plus long Perspectives :- Détection des mutations sur microarray - Stock de sondes « universelles » 11

12 12 Merci à tous de votre attention


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