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La Société nationale de l’VCS Sherbrooke Le 28-29 septembre, 2013 Le Dr. Stephen E. Fry MD La Société nationale de l’IVCC tient à remercier Michel Sastre.

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1 La Société nationale de l’VCS Sherbrooke Le septembre, 2013 Le Dr. Stephen E. Fry MD La Société nationale de l’IVCC tient à remercier Michel Sastre pour cette traduction.

2  Médecine générale  Fondateur– Fry Laboratories, LLC Vector Diagnostics, LLC Southwest Center for Chronic Disease 501(c)(3) Foundation Divulgations Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011

3  Dans tous les cas présentés, les patients ont fourni un consentement éclairé. Consentement éclairé Fry Laboratories, LLC Tous droits réservés ©2011

4 ‘Les microbes sont la cause de toutes les maladies.’ -Louis Pastuer Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011

5 “une communauté bactérienne multicellulaire structurée contenue dans une matrice polymérique autoproduite et qui adhère à une surface inerte ou vivante.” Traduction fondée sur JW Costerton “Bacterial Biofilms: A Common Cause of Persistent Infections” Biofilm-Définitions Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011

6 Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011 Adhésion Croissance Séparation

7 Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011 micro 552/July2004/Vol.2

8  Définition de cas - CDC - « … trouble débilitant et complexe caractérisé par une fatigue profonde que le repos couché n’améliore pas et que l’activité physique ou mentale peut aggraver. Les symptômes touchent plusieurs systèmes du corps et peuvent inclure de la faiblesse, des douleurs musculaires, une diminution de la mémoire et/ou de la concentration mentale, et de l’insomnie, ce qui peut amener à une diminution des activités journalières. »  Évidence radiologique/Schwartz et al - Détection d’anomalies chez des patients souffrant de fatigue chronique : comparaison entre l’imagerie par résonance magnétique et SPECT 1994;162: Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

9  10 des 14 patients, âgés de 25 à 56 ans (75%) sont positifs pour des hypersensibilités T2 Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

10  Altération de la myélinisation  Altération ischémique microvasculaire, oedème  Gliose, perte épendymaire, dégénérescence axonale  Inflammation, activation des macrophages  Infection? Bruck, W., et al., Annals of Neurology,Vol.42,Issue 5: ,Nov 1997 Moore,G, et al., Neurology,Vol. 55, no. 10: , Nov 2000 Kim,K.,et al. Biol. Psychiatry,, 64(4): , Aug 2008 Geurts,J.,et al. Am J Neuroradiol 26: , March 2005 Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

11 Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved©2009

12 Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved©2009

13 Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved©2009

14 ) ADN coloré SCF Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2009

15 Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2010

16 Ellis J.E., M. Prochazka, and S.E. Fry. In Situ Hematologic Biofilm Community in 3 Patients with Amyotrophic Lateral Sclerosis. Proceedings 5 th International Biofilm Conference, Cancun, Abstract 158. Groupement de biofilm - ADN Contrecolorant/SLA (Maladie de Lou-Gehrig) Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2009

17 Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2009 ADN Coloré - Groupement dynamique de biofilm / SLA

18 WBC Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved©2009 Extraction de grappe de groupement de biofilm Localisation de l’AND Schéma de l’extraction de groupement de biofilm pour analyse moléculaire

19  -proteobacteria  -proteobacteria  -proteobacteria Phylogenèse bactérienne Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2009 Les noms en latin ne doivent pas être traduits Analyse bactériologique de l’ADN de la descendance périphérique des biofilms des différents types de maladies - SLA, SFC,Fibromyalgie

20 Patient souffrant de la SLA Personne non affectée Contrôle positif (Toxoplasma) Contrôle négatif 200 bp 300 bp Pan-Apicomplexa PCR Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2009 réaction en chaîne de la polymérase Gel de repérage de la bande apicomplexa de la SLA

21 100bp SLA #1 SLA #2 + Contrôle - Contrôle RCP des protozoaires dans la SLA (‘FL1953’) Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2010

22 Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2010

23  Séquence d’identification unique.  Jusqu’à l’obtention d’un consensus, carte génomique désignée “FL1953”.  Été 2011 premier passage de la cartographie génomique d’un isolat « LES » (lupus érythémateux systémique)  Selon les critères, un érythroblaste révèle un « nouvel organisme »  ‘Protomyxzoa rheumatica’ Questionnement particulier du protozoaire Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011

24 AND Coloré 400x Fl*MMG Coloré 1000x Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

25  Acanthomoeba spp.  Trypanosomiasis brucei Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

26 Acanthamoeba spp. Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011

27  Un pathogène ravageur  Manifeste un comportement social lorsque cultivé sur agar (gélose) semi-solide  Médiation flagellaire Oberholzer M. et al., PLOS Pathogens 6(1):e Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

28  ‘Hypothèse portant sur l’hygiène’ Correale J, Farez MF. Mult Scler Oct;17(10):  Dextromethorphan/quinidine Panitch HS, et al. Ann Neurol May;59(5): Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

29  Certains autres chercheurs ont mis en cause dans la SEP un organisme comme celui de la malaria  Étude de l’article: Kisler, H. (2001 ). Is multiple sclerosis caused by a silent infection with malarial parasites? A historicoepidemiological approach: Part I and Part II. Medical Hypothesis 57(3): and SEP et Malaria Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011

30  La distribution géographique de la SeP augmente avec la diminution de la distribution des plasmodies.  L’infection par des plasmodies en enfance protège de la SeP plus tard.  L’efficacité de la quinine pour le traitement de la SeP soutient la connexion avec les parasites de la malaria. Étude de plus de 75 articles Kisler/Malaria Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011

31 Zamboni, P., et al., A prospective open-label study of endovascular treatment of chronic cerebrospinal venous insufficiency. J Vasc Surg, (6): p Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011 Doppler Transcranial and Extracranial des veines d’un patient souffrant de SeP, VJI (veines jugulaires internes) Filaments et Obstruction

32 Classification des anomalies vasculaires par ultrason Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2012 Zamboni, P., et al., A prospective open-label study of endovascular treatment of chronic cerebrospinal venous insufficiency. J Vasc Surg, (6): p

33  Anomalies circonférentielles  Structures membraneuses en orientation longitudinale  Petits septa membraneux  ‘ …la fréquence d’anomalies intraluminales avec la possibilité de séquelles hémodynamiques était plus élevée chez les malades de la SeP par rapport aux témoins normaux…’ Fox,R, et al. ECTRIMS- Cleveland Autopsy Study, Oct Étude des veines de 7 témoins avec SEP et 6 témoins sans SEP selon l’autopsie après injection de silicone. Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

34 Environnement de biofilm Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011 Voyons-nous l’évidence macroscopique de biofilms dans le sang de malades chroniques? Masse périphérique stabilisée de biofilm avec, au centre, dans la zone de plus forte circulation une formation filamenteuse est visible.

35 Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2010 FLA1953 filaments chez un patient souffrant de SFC, ADN coloré Fl*, sang périphérique, veineux.

36 “Filaments” macroscopiques Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013 Malade chronique, échantillon de sang périphérique macro à micro, Fl* ADN coloré

37  Des brins de biofilm provoquent des perturbations catastrophiques de la circulation, affectant les systèmes environnemental et médical.  Drescher K, Shen Y, Bassler BL, Stone HA. Drescher KShen YBassler BL Stone HA  Department of Molecular Biology, Princeton University, Princeton, NJ 08544, USA.  Abstract  PMID: [PubMed - indexed for MEDLINE] PMCID: PMC Free PMC ArticleFree PMC Article  PNAS 2013 Mar 12;110(11): doi: /pnas Epub 2013 Feb 11. AS Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

38  Swank RL, Dugan BB (July 1990). "Effect of low saturated fat diet in early and late cases of multiple sclerosis". Lancet 336 (8706): 37–9. doi: / (90)91533-G. PMID doi / (90)91533-G PMID  McDougall. et al, 2013 Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

39  Le plasmodium est incapable de synthétiser de novo certains acides gras essentiels et le cholestérol.  La présence de cholestérol et d’acide gras chez l’érythrocyte hôte est essentielle pour la vacuolisation du parasite de la malaria Holz, G.G. Lipids and the malarial parasite (1977). Bulletin of the World Health Organization, 55(2-3): Protozoaires et lipides Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011

40  L’ajout de cholestérol aux souches de plasmodium réduit considérablement la sensibilité à la chloroquine. Ginsberg, H., et al., (1988). Effect of Cholesterol-Rich Diet on the Susceptibility of Rodent Malarial Parasites to Chloroquine Chemotherapy. Life Sciences, 42(1): Protozoaires et lipids (suite) Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011

41 ‘FL1953’ et enrichissement en acides gras Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011 Effets d’apport complémentaire de lipide sur FL1953

42 ‘FL1953’ chez 3 patients suivant une restriction des lipides pendant un laps de temps Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011

43 BEFORE AFTER Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011 Protomyxzoa chez 3 patients suivant une restriction de lipides

44  ‘…la minocycline est sans danger et potentiellement avantageuse pour traiter la sclérose en plaques rémittante.’ Zhang Y, et al. Can J Neurol. Sci. ;35(2):185-91, May 2008 ‘ La minocycline serait une thérapie efficace et sans danger pour la SEP’.’ Chen, X, et al. J neuroImmunology;235(1-2), June 2011 ‘… L’interféron ß-1a et la doxycycline en dose orale ont été efficace …’ Minagar A, et al. Arch Neurol Feb; 65(2): Malaria - Doxycycline utilisée en prophylaxie pour la malaria, CDC-Travelers health Chap. 3 Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

45 C. tarsalis #1 C. tarsalis #2 C. tarsalis #3 C. Quinquefasciatus #1 Échelle Culex tarsalis Culex quinquefasciatus C. Quinquefasciatus #2 C. Quinquefasciatus #3 C. Quinquefasciatus #4 C. Quinquefasciatus #5 C. Quinquefasciatus #6 C. Quinquefasciatus #7 C. Quinquefasciatus #8 C. Quinquefasciatus #9 C. Quinquefasciatus #10 C. Quinquefasciatus #11 C. Quinquefasciatus #12 81% de positifs Leah Balasa, B.S. ‘FL1953’ à transmission vectorielle Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2010 Traduction non nécessaire des noms des moustiques

46  Mécanique  Restriction des lipids  Antipaludéens/antiprotozoaires  Agents contre les biofilms  Agents immunomodulateurs Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

47

48  Métagénomique  Étude de Phoenix – 30 patients souffrant de SFC, 30 souffrant de SeP, et 30 souffrant de SLA Lou-Gehrig/ et plus de 100 témoins  Étude de la vascularité – plaque artérielle obtenue par artériectomie par succion chez 15 patients Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

49  Haute sensiibilité et spécificité  Réoriente la compréhension vers des infections aigües et chroniques  Aucun besoin de supposition  Approche « tout compris », aucune exclusion  Permet une évaluation des communautés de biofilm Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

50 Dental Necrotic Lesion – Tooth Sample Antibiotics: Clindamycin Resistance: Erythromycin, ciprofloxacin, tetracycline, penicillin, and other macrolides. Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

51  Représente des travaux sur un certain nombre d’échantillons présentant diverses conditions d’inflammation chronique  La plupart issus de SFC/fibromyalgie  Résultat d’un haut débit d’alimentation  Création de plusieurs protozoaires Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

52 Protomyxozoa rheumatica Cilliated? Flow-Loving Novel Sub-Phylum? Apicomplexan * * * * - Specific qPCR Blood-Borne Protozoan Cladistics Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2013

53 Chromalveolata (Latin utilisé en français) Arbre des eukaryotes (eucariotes, eucaryotes) Les autres noms n’ont pratiquement aucun intérêt pour les participants autres que les biologistes

54 B1 D1 * * * * *

55

56  Classe de protozoaire parasite vasculaire qui forme un biofilm  Principalement transmis par vecteur  Affectionne les lipides  Très résistant aux médicaments et aux réactions immunitaires, mais les anti-protozoaires et les anthelminthiques (antihelminthiques) peuvent être efficaces  Peut être un agent potentiel dans une foule de maladies chroniques  Addressing the biofilm will be a key in approach Fry Laboratories, LLC All Rights Reserved ©2011


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