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MATRICE EXTRA- CELLULAIRE MEMBRANE CELLULAIRE CYTOPLASME AU NIVEAU DUNE PLAQUE DADHESION LA PLAQUE DADHESION Paxilline Daprès Alan Horwitz, « Ladhérence.

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2 MATRICE EXTRA- CELLULAIRE MEMBRANE CELLULAIRE CYTOPLASME AU NIVEAU DUNE PLAQUE DADHESION LA PLAQUE DADHESION Paxilline Daprès Alan Horwitz, « Ladhérence des cellules » Dossier Hors série Pour la Science, 1998

3 Le cycle des plaques adhésion dans la cellule en migration Daprès D.A. Lauffenberger and Alan Horwitz, Cell, 1996.

4 5 1 v 3 Daprés Eli Zamir and coll., Nature and Cell Biology, Vol 2, 2000: Dynamique et ségrégation des adhésions cellule–matrice chez des fibroblastes en culture

5 La mobilité des cellules dépend des interactions cellules/matrice Daprès Elisabeth A. Cox, David Bennin, Ashley T. Doan, Timothy OToole and Anna Huttenlocher, Molecular Biology of the Cell, Vol. 14, 658–669, February 2003.

6 DYNAMIQUE DE LACTINE

7 Daprès D.A. Lauffenberger and Alan Horwitz, Cell, 1996.

8 Daprès Thomas D. Pollard1, and Gary G. Borisy, Cell, Vol. 112, 453–465, February 21, La polymerisation de lactine fait naitre la lamellipode

9 DYNAMIQUE DES PLAQUES DADHESION

10 Keratocyte sur silicone Visualiser les forces Les forces dépendent de protéines kinases Staurosporine inhibe les kinases Le LPA active les kinases Y27632 inhibe la ROCK1 Qui phosphoryle la Myosin II Les differents complexes Integrine/substrat repondent a la contractilite du systeme ACTO-MYOSINE Segregation des integrines Consolidation des plaques dadhesion Daprès Eli Zamir and coll., Nature and Cell Biology, Vol 2, 2000: Daprès Kevin Burton et al., Molecular Biology of the Cell, Vol. 10, 3745–3769, November 1999.

11 Alpha 5GFP Protéine de fusion alpha5-GFP N-term C-term Visualiser les plaques dAdhesion UV Fluorescence verte Les plaques dadhésion sont sensibles à la tension: Y27632(=Inhibiteur de la RhoKinase, kinase qui active la myosine II) détruit transitoirement les plaques dadhésion Daprès Christoph Ballestrem, et al., The Journal of Cell Biology, Volume 155, Number 7, December 24, –1332

12 Localisation de la Paxilline chez Dictyostelium discoideum Daprès Tanya Bukahrova, et al., Journal of Cell Science 118, « Paxillin is required for cell-substrate adhesion, cell sorting and slug migration during Dictyostelium Development »

13 RELATION ENTRE PLAQUES DADHESION ET MICROTUBULES Daprès Irina Kaverina, Olga Krylyshkina, and J. Victor Small, J. Cell Biol Vol. 146 No. 5 p « Microtubule Targeting of Substrate Contacts Promotes Their Relaxation and Dissociation »

14 LES MICROTUBULES ET LES PLAQUES DADHESION Daprès Irina Kaverina et al. J. Cell Biol Vol. 146 No. 5 p.1033.

15 Daprès Snezhana Oliferenko, Irina Kaverina, J. Victor Small, and Lukas A. Huber, J. Cell Biol Vol. 148 No. 6 p Hyaluronic Acid (HA) Binding to CD44 Activates Rac1 and Induces Lamellipodia Outgrowth. L Acide Hyaluronique (HA) induit la formation de lamellipodes Via la petite proteine G Rac

16 Migration des cônes de croissances: Images en lumière polarisée (Pol-scope) Daprès Kaoru Katoh, Katherine Hammar, Peter J. S. Smith, and Rudolf Oldenbourg, Molecular Biology of the Cell, Vol. 10, 197–210, January « Birefringence Imaging Directly Reveals Architectural Dynamics of Filamentous Actin in Living Growth Cones»

17 Migration des cellules in vivo 1) Explants de tissu embryonnaire, lampe tres puissante pour echantillon epais. 2) Cellules sensees migrer microinjectees avec GFP (DiI.mov) ou Rac N17-GFP (Ginsberg) Cellules Rac sauvages: Tres longues lamellipodes, cellules sautent: vitesse de migration non lineaire, contraintes dadhesion differentes. Cellules Rac N17 cellules font toujours des lamellipodes mais bougent moins vite.

18 Migration cellulaire lors de la formation du pseudo-champignon chez D. discoideum Souche exprimant 2% de cellules PaxB-null (KO pour PaxB marquées à la GFP= vertes) et 2% de cellules PaxB wt exprimant la RFP= rouges (filmdictyo_movie6) Daprès Tanya Bukahrova, et al., Journal of Cell Science 118, « Paxillin is required for cell-substrate adhesion, cell sorting and slug migration during Dictyostelium Development »


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