Contrôle Qualité : Diagnostics moléculaires

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1 Contrôle Qualité : Diagnostics moléculaires

2 Vue générale Prélèvement, transport, et traitement de l’échantillon
maintenir l’intégrité des acides nucléique à travers tous le processus Contrôle de la contamination établir un circuit unidirectionnel de la zone de préparation des réactifs (ADN free) à la zone de traitement de l’échantillon, à la zone d’amplification et de détection Contrôles positif et négatif Référence: CLSI MM3-A (Méthode de diagnostic moléculaire pour les maladies infectieuses) Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 2 2

3 Contrôle Qualité: diagnostics moléculaires
Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 3 3

4 Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8
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5 Real Time-PCR (temps réel)
ECHANTILLON Cible AN amplifiée Taq polymerase Fluorescence Quantitative PRIMER SYBR Green + - In Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 5 5

6 Réactions d’amplification
POSITIVE PAS d’ AMPLIFICATION Amplification / Temps Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 6 6

7 Real Time-PCR (temps réel)
Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 7 7

8 A/H3 Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 8 8

9 A/H5 Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 9 9

10 Résultat négatif Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 10 10

11 Risques avec la PCR La plupart des RT-PCR sont faîtes « sur place »
les primers ne sont pas nécessairement optimisés pour le test les contrôles positifs sont « maison » les contrôles négatifs sont « maison » L’interprétation des tests a besoin d’être faite prudemment Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 11 11