Hépatites A, l’intérêt de la PCR

Présentation au sujet: "Hépatites A, l’intérêt de la PCR"— Transcription de la présentation:

1 Hépatites A, l’intérêt de la PCR
Les 8éme Journées de RHEVIR 23/09/05 BENOIT PONSEILLÉ

2 Hépatites A, l’intérêt de la PCR
Les 8éme Journées de RHEVIR 23/09/05 BENOIT PONSEILLÉ

3 Introduction 1ère cause d’hépatite aiguë chez l’enfant Transmission:
Pays sous développé Pays industrialisé Transmission: oro-fécale +++ parentérale (facteur VIII) Virus ARN simple brin Virus nu résistant ++

4 Moyens diagnostics Diagnostic indirect ++ Diagnostic direct
Sérologie : ELISA Diagnostic direct Culture Antigénémie Recherche du génome par PCR IgM= Hépatite aigue

5 Technique d’amplification génomique: PCR
Faible variabilité génomique entre les souches Virus à ARN Nécessité de quantification de la virémie Reverse transcription PCR ( RT-PCR) PCR quantitative en temps réel

6 Technique d’amplification génomique: PCR
RT- PCR qualitative ciblé sur 3 régions différentes (VP3/VP1;VP1/VP2;VTR) Technique « maison » Très sensible et spécifique Pas de quantification

7 Technique d’amplification génomique: PCR
RT PCR kit light cycler Kit commercial facile d’utilisation Permet quantification gamme d étalonnage

8 Intérêt de la PCR Diagnostic Précocité du diagnostic Virémie présente:
30 jours avant survenue des symptômes en moyenne 10 jours avant l’apparition des IgM. 80% PCR HAV jours avant le pic ALT Virémie persiste 70 jours

9 Intérêt de la PCR - Contagiosité Charge virale moyenne retrouvée:
Sanguine: 10.5 cp/ml Selles : 10.9 cp/ml Salive : 10.3 cp/ml Urines : pas excrétion urinaire Voie sanguine infectieux que voie fécale PCR HAV + dans les selles 49 jours en moyenne 21 jours après début symptômes

10 Intérêt de la PCR Quantification charge virale sérique
(CHU Lapeyronie, service virologie) Age Sexe IgM PCR(IU/ml) 1 63 M + 2,6. 10³ 2 28 37. 10³ 3 45 3,3. 10³ 4 27 9,2. 10³ 5 36 0,25. 10³ 6 26 1. 10³ 7 47 4 . 10³ 8 14 ³ 9 ³ 10 40 F ³ 11 34 4,2 . 10³

11 Intérêt de la PCR Pronostic
Pas corrélation entre charge virale/ durée virémie et gravité Cas à part: Hépatite fulminante Virémie indétectable ou effondrée Faible virémie = marqueur fortement associé à une défaillance hépatique ( réponse immunitaire) Aide au choix de la transplantation; Encéphalopathie +V effondré+ virémie indétectable

12 Intérêt de la PCR Epidemiologique
Séquencage du virus amplifié génotype des virus Génotype Ia et Ib les plus fréquents Différenciation cas isolé – début d’épidémie - Impact du génotype aucun sur la charge virale et virulence Virémie plus longue en cas de Génotype Ia

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