La présentation est en train de télécharger. S'il vous plaît, attendez

La présentation est en train de télécharger. S'il vous plaît, attendez

Biologie moléculaire Dans la vie dun biologiste. Cas clinique hépatite C Mr X, 47 ans,effectue bilan préopératoire Le bilan biologique montre: NFS normale.

Présentations similaires


Présentation au sujet: "Biologie moléculaire Dans la vie dun biologiste. Cas clinique hépatite C Mr X, 47 ans,effectue bilan préopératoire Le bilan biologique montre: NFS normale."— Transcription de la présentation:

1 Biologie moléculaire Dans la vie dun biologiste

2 Cas clinique hépatite C Mr X, 47 ans,effectue bilan préopératoire Le bilan biologique montre: NFS normale ALAT, ASAT: 2 x la normale AgHBs – Anti-HBs:+ Sérologie hépatite C positive

3 Examens complémentaires à pratiquer ARN Génotypage Sérotypage viral Charge virale hépatite C Électrophorèse des protéines Bêta 2 microglobuline Bilirubine

4 Examens complémentaires ARN: Témoin de la réplication: 20% hep C sont ARN négatif Plus sensible que la charge virale: Amplicor: 50UI CV amplicor: 600 à UI bDNA: 615 à UI Mais PCR en temps réelsensibilité: 15UI

5 Examens complémentaires Sérotypage ou génotypage: idem, indispensable pour mise sous traitement Sérotypage ne donne pas sous type (1,2….) Mais pas dinfluence sur le traitement Génotypage est plus précis Traitement et suivi sont conditionnés par le génotype

6 Examens complémentaires à pratiquer Charge virale hépatite C ARN Génotypage Sérotypage viral Électrophorèse des protéines Bêta 2 microglobuline Bilirubine

7 Génotypage se fait par: Séquençage région NS3 Séquençage région NS5 INNO LIPA PCR en temps réel

8 Génotypage Région 5 NC le plus fréquent, quelquefois pas sous-typage NS5: plus de variabilité INNO LIPA: Bonne technique, facile PCR en temps réel: avenir!!!!!!!!!

9 Génotypage se fait: Séquençage NS3 Séquençage NS5 INNO LIPA PCR en temps réel

10 Décision médicale: Mise sous traitement

11 Avant traitement Charge virale Détection de mutations de résistance au traitement par séquençage

12 Avant traitement Charge virale: Indiquée pour génotypes 1,4,5 Pas nécessaire pour génotypes 2 et 3 Recherche de mutations de résistance: - Pas de nouvelles molécules : antiprotéases???

13 Avant traitement Charge virale Détection de mutations de résistance au traitement par séquençage

14 Suivi pendant traitement ARN mensuel Charge virale hebdomadaire Transaminases hebdomadaires ARN à M6 NFS mensuelle Hormones thyroïdiennes

15 Suivi pendant traitement Génotype 1: charge virale à S12 (consensus 2002) ou à S4 (2006) Génotypes 2 et 3: ARN à M6 Transaminases tous les mois NFS tous les mois Hormones thyroïdiennes: TSH tous les 3 mois

16 Suivi pendant traitement ARN mensuel Charge virale hebdomadaire Transaminases hebdomadaires ARN à M6 NFS mensuelle Hormones thyroïdiennes

17 Suivi post traitement ARN mensuel Charge virale bi-annuelle ARN à M6 puis 1 an Génotypage Séquençage pour mutations de résistance

18 Suivi post traitement ARN mensuel Charge virale bi-annuelle ARN à M6 puis 1 an Génotypage Séquençage pour mutations de résistance

19 Hépatite B Mr C, origine asiatique, arrivé en France depuis 6 mois consulte en gastro-entérologie HAV totaux pos HAV IgM: neg Ag HBs pos Anti-HBc pos avec IgM neg Ag HBe neg Anti-HBe pos Hépatite C neg

20 Examens complémentaires à demander ADN B Sérologie hépatite delta ADN delta Génotypage Hépatite B Anti-HBs

21 Examens complémentaires à demander ADN B : indispensable Facteur de gravité : hépatite delta 5% AgHBs sont infectés par delta Virus delta: pas de technique commerciale mais techniques de RT-PCR maison et maintenant PCR en temps réel Génotypage ???

22 Examens complémentaires à demander ADN B Sérologie hépatite delta ADN delta Génotypage Hépatite B Anti-HBs

23 ADN B bDNA PCR classique PCR en temps réel TMA bDNA détecte 25 UI/L

24 Techniques ADN b bDNA linéarité : 615 à 7,7 millions UI/ml Amplicor Linéarité: fonction de la dilution (galère!!!!!!!!) Sensibilité: 200UI/ml PCR temps réel Linéarité : millions UI/ml 12 – 50 millions UI/ml Sensibilité : 12 UI/ml soit 70 copies/ml

25 ADN B bDNA PCR classique PCR en temps réel TMA bDNA détecte 25 ui

26 Décision thérapeutique Patient est mis sous Lamivudine avec une charge virale à 8800 UI/ml

27 Suivi Médical sous traitement ADN B mensuel NFS hebdomadaire Charge virale hépatite delta AgHBs mensuel

28 Suivi Médical sous traitement ADN B trimestriel ALAT trimestrielle Si négativation de lADN, faire un AgHbS La négativation de lag HBs est rare sous lamivudine, 5 à 10% sous interféron

29 Suivi Médical sous traitement ADN B mensuel NFS hebdomadaire Charge virale hépatite delta AgHBs mensuel

30 Au bout de 6 mois, la charge virale par bDNA est < 350UI/ml Après 2 ans de traitement, la charge virale est de UI/ml

31 Quels examens doit on pratiquer? Génotypage Charge virale hépatite delta Ag Hbe Recherche mutant C/préC Recherche mutation YMDD

32 Traitements Interféron + peg –interféron Analogues nucléosidiques: Lamivudine :3TC Emtricitabine: Emtriva Adefovir: Hepsera Tenofovir: Viread clevudine entecavir

33 Incidence des résistances Lamivudine: 24% en 1 an 70% en 4 ans Adefovir 15% en 4 ans ceci en monothérapie Intérêt des bi ou trithérapies????

34 mutation YMDD : la + fréquente, mutation de résistance à la lamivudine, emtricitabine Pas de résistance croisée entre les différents nucléosidiques et nucléotidiques Incidence des résistances

35 Terminal protein spacerPol/RT RNaseH I(G)II(F)A BC DE (rt1) 692 (rt344) 845 a.a. LAM ADV ETV LdT L801 L180M V173L A181V S184G I169T M204V/I/S N236T M202I M204I M250V GVGLSPFLLAYMDD TDF V1911I A194T

36 Quels examens doit on pratiquer Génotypage Charge virale hépatite delta Ag HBe Recherche mutant C/préC Recherche mutation YMDD

37 Recherche de résistance à la Lamivudine Séquençage Hybridation moléculaire PCR en temps réel Phénotypage antivirogramme

38 Recherche de résistance à Lamivudine Séquençage Hybridation moléculaire PCR en temps réel Phénotypage antivirogramme


Télécharger ppt "Biologie moléculaire Dans la vie dun biologiste. Cas clinique hépatite C Mr X, 47 ans,effectue bilan préopératoire Le bilan biologique montre: NFS normale."

Présentations similaires


Annonces Google