Rôle du récepteur de l'urokinase sur

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1 Rôle du récepteur de l'urokinase sur
la migration cellulaire et ses applications dans l'angiogénèse et l'athérome. Marc Vasse Faculté mixte de Médecine & Pharmacie de Rouen Laboratoire MERCI (MicroEnvironnement et Renouvellement Cellulaire Intégré) EA 3829 (Pr JP VANNIER)

2 LES MECANISMES NECESSAIRES A LA MIGRATION CELLULAIRE

3 MIGRATION CELLULAIRE ET ANGIOGÉNÈSE
Les phases d’initiation de l’angiogénèse: 1- Augmentation de la perméabilité vasculaire et dépôt extravasculaire de fibrine 2- Dissociation de la structure du vaisseau 3- Dégradation de la membrane basale 4- Migration des cellules endothéliales et invasion de la MEC 5- Prolifération des cellules endothéliales 6- Formation de la lumière capillaire

4 LES SYSTEMES ENZYMATIQUEES RESPONSABLES DE LA DEGRADATION DE LA MEC
ROLES DE LA PLASMINE DANS LA DEGRADATION DE LA MEC: CLIVAGE DE PROTEINES DE LA MEC: - FIBRONECTINE - LAMININE - THROMBOSPONDINE - FACTEUR WILLEBRAND LIBERATION DE FACTEURS ANGIOGENIQUES - VEGF - bFGF (FGF-2) - TGF- ACTIVATION DES MMP

5 ENZYME CLE DU SYSTEME FIBRINOLYTIQUE
LA PLASMINE ENZYME CLE DU SYSTEME FIBRINOLYTIQUE (Cesarman-Maus et. Hajjar, BJH 2005; 129: 307) 1939: description d’une activité fibrinolytique au niveau des vaisseaux en croissance, par Clark et Clark L’inhibition de la plasmine par l’acide tranexamique ou l’acide -amino caproïque inhibe l’angiogénèse Les souris Plg -/- ont une angiogénèse réduite

6 LE RECEPTEUR DE L’UROKINASE (CD 87)
LOCALISATION DE L’u-PA SUR UN POLE DE LA CELLULE

7 STRUCTURE DU RECEPTEUR DE L’UROKINASE
Glycoprotéine de 55 kDa, fortement glycosylée, ancrée dans la membrane par un glycophosphatidyl inositol 3 fonctions: - localisation de l’uPA sur la membrane cellulaire (AA 1-48; AA ) - fixation de la vitronectine - clairance de l’uPA Activité chimiotactique Mobilité (Blasi & Carmeliet, 2002; 3: 932)

8 L’EXPRESSION d’u-PAR et d’u-PA EST AUGMENTEE PAR
LES FACTEURS ANGIOGENIQUES (Pepper et coll. J Cell Biol, 1993; 122:673) Tem IL-4 IL-10 OSM u-PA u-PAR Actine (Mandriota et coll. J Biol Chem, 1995; 270:9709)

9 LE BLOCAGE DE L’u-PAR PAR DES ANTICORPS
INHIBE LA FORMATION DE CAPILLAIRES IN VITRO A B C bFGF + MAb H-2 bFGF Contrôle (Kroon et coll., ATVB, 1999; 154: 1731)

10 u-PAR ET ADHESION CELLULAIRE
EFFET DIRECT MULTIMERIQUE

11 u-PAR ET ADHESION CELLULAIRE
EFFET INDIRECT

12 INTERACTIONS DU RECEPTEUR DE L’UROKINASE
AVEC LE PAI: CLAIRANCE DE L’u-PA ET MIGRATION

13 L’u-PAR EST REEXTERNALISE APRES DEGRADATION
DU COMPLEXE u-PA/PAI-1 T = 0 T = 0 T = 30’ + RAP T = 30’ T = 120’ T = 60’ (Incubation avec cycloheximide)  Rôle dans le détachement de la cellule T = 120’ Les souris PAI-1 -/- ont une angiogénèse réduite en raison d’une migration défectueuse des cellules endothéliales (Bajou et coll, 1998; 4: 923)

14 u-PAR ET TRANSMISSION DU SIGNAL (1)
L’u-PA OU SON EXTREMITE AMINO TERMINALE (ATF) INDUIT LA MIGRATION CELLULAIRE ET LA PROLIFERATION DES CELLULES ENDOTHELIALES (Stahl et coll., Cancer Res, 1994; 54: 3066) NECESSITE D’ADAPTATEURS

15 u-PAR ET TRANSMISSION DU SIGNAL
ROLE DES INTEGRINES

16 u-PAR ET TRANSMISSION DU SIGNAL
AUTRES ADAPTATEURS

17 ACTIVATION LA VOIE DES JAK/STAT DANS LES CELLULES ENDOTHELIALES
Co-précipitation de l’u-PAR avec Jak-1 et Tyk2 La liaison d’uPA ou d’ATF induit la translocation de STAT-1 dans le noyau L’activation est inhibée si les cellules sont traitées par PI-PLC  rôle de l’u-PAR STAT-1: impliquée dans la prolifération des cellules endothéliales (Dumler et coll., ATVB, 1999; 19: 290)

18 u-PAR ET TRANSMISSION DU SIGNAL
ROLE DE LA CAVEOLINE

19 LE BLOCAGE DE L’INTERACTION u-PA/u-PAR
BLOQUE L’ANGIOGENESE AA de l’u-PA INTERAGISSENT AVEC L’ u-PAR L’OCTAPEPTIDE A6 (KPSSPPEE) INHIBE l’ANGIOGENESE TUMORALE (Guo et coll, FASEB J, 2000; 14: 1400)

20 L’ATF COUPLE A L’ALBUMINE
BLOQUE L’ANGIOGENESE Une chimère ATF-Albumine bloque la déformabilité des cellules endothéliales (Li et coll., FEBS Lett. 1996; 12;380)

21 UN ADENOVIRUS PRODUISANT DE L’ATF BLOQUE L’ANGIOGENESE
Control + AdmATF (J20) Xénogreffe de MDA-MB-231 chez la souris Nude (Li et coll., Gene Ther ; 5: 1105-)

22 AUGMENTATION D’EXPRESSION DU CD 87 EN FONCTION DU STADE DES LESIONS ATHEROMATEUSES
MNA: artères normales EL: lésions précoces FP: Plaques fibreuses CP: Plaques calcifiées (Besta et coll., Thromb Res., 2004; 114: 283) (Steins et coll, Blood Coag Fibrin., 2004)

23 LE RECEPTEUR DE L’UROKINASE (CD87) ET L’ADHESION LEUCOCYTAIRE
Les monocytes des souris uPAR -/- présentent un défaut de migration (Chavakis et coll., Bioch Soc Trans 1999)

24 L’uPAR EST IMPLIQUE DANS L’INFILTRATION DE LA PAROI VASCULAIRE CHEZ LES SOURIS APO E -/-
Le CD11b est impliqué dans l’infiltration des monocytes Thoracic aorta 5 0.364 ± 0.071 0.254 ± 0.052* 0.317 ± 0.102** n uPAR anti-MAC Ig G2 non rel. (Gu et coll., J Cell Physiol, 2005; 204: 73)

25 L’u-PAR DES MONOCYTES EST AUGMENTE A LA PHASE AIGUË DE L’INFARCTUS DU MYOCARDE
(CSA : angor stable) (May et coll, Blood. 2002; 100: 3611) ADHESION SUR LES CELLULES ENDOTHELIALES

26 LES LIPOROTEINES ET LEURS FORMES OXYDEES AUGMENTENT
L’EXPRESSION D’u-PAR A LA SURFACE DES MONOCYTES * µg/ml 1,2 1,0 0,8 0,6 u-PA (IMF) LDL LDL ox Lp(a) Lp(a) ox ** * ** 2 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 2 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 * * ** u-PAR (IMF) µg/ml µg/ml LDL LDL ox Lp(a) Lp(a) ox (Ganne et coll, Thromb Haemos, 1999)

27 LES STATINES DIMINUENT L’EXPRESSION D’u-PAR, DE SON PAR LES MONOCYTES IN VITRO ET IN VIVO
Diminution d’u-PA et d’u-PAR induite par les lipoprotéines in vitro Témoin LDL LDL ox u-PA u-PAR (Ganne et coll, Thromb Haemos, 1999) Tem AVK AVK AIA TVP p = 0,003 p = 0,001 Diminution d’u-PAR à la surface des monocytes de patients traités par des statines

28 L’IL-10 DIMINUE L’EXPRESSION D’u-PAR PAR LES MONOCYTES
ET LEUR ADHESION SUR LE FBG OU LA VN                                                 (Paysant et coll., Br J Heamatol 1998; 100:45)

29 CONCLUSION LE RECEPTEUR DE L’UROKINASE JOUE UN ROLE DYNAMIQUE
IMPORTANT DANS LES PHENOMENES D’ADHESION ET DE MIGRATION CELLULAIRE IL CONSTITUE UN DES ELEMENTS PERMETTANT LA DEGRADATION DES PROTEINES DE LA MATRICE EXTRACELLULAIRE, MAIS VOIT SON ACTIVITE MODULEE PAR LES COMPOSANTS DE LA MATRICE LES MECANISMES DE TRANSDUCTION DU SIGNAL RESTENT A ELUCIDER LA MODULATION PHARMACOLOGIQUE DE L’u-PAR PEUT CONSTITUER DE NOUVELLES CIBLES PHARMACOLOGIQUES

30 REMERCIEMENTS Bienvenue à I. DUBUS Pr JP VANNIER Pr C. SORIA
C. CORBIERE, MCU B. LENORMAND E. LEGRAND D. BIGOT S. LECLEIRE J. PAYSANT F. GANNE Bienvenue à I. DUBUS