APC & Choc Septique Contributions respectives des activités anticoagulante, anti-inflammatoire et cytoprotectrice de l’APC* à son efficacité dans le choc.

Présentation au sujet: "APC & Choc Septique Contributions respectives des activités anticoagulante, anti-inflammatoire et cytoprotectrice de l’APC* à son efficacité dans le choc."— Transcription de la présentation:

1 APC & Choc Septique Contributions respectives des activités anticoagulante, anti-inflammatoire et cytoprotectrice de l’APC* à son efficacité dans le choc septique. E.J. Kerschen et al. (Milwaukee, Etats-Unis) Résumé 1 J.S. Bae et al. (Saint Louis, Etats-Unis) Résumé 62 X.V. Yang et al. (La Jolla, Etats-Unis) Résumé 65 ASH 2006. * Protéine C activée.

2 APC & Choc Septique La protéine C activée (APC – Activated Protein C) exerce à la fois des activités anticoagulante, anti-inflammatoire et cytoprotectrice. Les contributions respectives de ces différentes activités à l’efficacité globale de l’APC pour réduire la mortalité dans le choc septique sont encore inconnues. Trois approches complémentaires concourent à l’éclaircissement de cette question. Contexte E.J. Kerschen et al. (Milwaukee, Etats-Unis) Résumé 1 J.S. Bae et al. (Saint Louis, Etats-Unis) Résumé 62 X.V. Yang et al. (La Jolla, Etats-Unis) Résumé 65 ASH 2006.

3 APC & Choc Septique Choc septique chez la souris Critère de jugement Mortalité (% des animaux) Modèle « Escherichia coli » Injection i.p. d’une DL50 de lipopolysaccharide 1 (1)Lipopolysaccharide (LPS) : endotoxine d’Escherichia coli i.v. = intraveineux i.p. = intrapéritonéal DL50 = dose tuant la moitié des animaux Modèle « Staphylococcus aureus » Injection i.p. d’une DL50 de bactérie entière APC recombinante murine (mrAPC) : 0,04 à 0,2 mg/kg de poids corporel en i.v. Concomitamment Concomitamment, ou jusqu’à 3 heures après l’injection létale E.J. Kerschen et al. Principes E.J. Kerschen et al. (Milwaukee, Etats-Unis) Résumé 1 ASH 2006.

4 APC & Choc Septique E.J. Kerschen et al. Résultats * Mutants 3- ou 5-A ** Mutation de la sérine 330 du site catalytique en alanine (S360A) Une mortalité passée de 50% à 0-10% grâce à l’addition de protéine C activée ou de son mutant non anticoagulant. E.J. Kerschen et al. (Milwaukee, Etats-Unis) Résumé 1 ASH 2006.

5 APC & Choc Septique E.J. Kerschen et al. Conclusions La réduction de mortalité dans le choc septique est due à l’action enzymatique de l’APC, médiée non par un effet anticoagulant mais par la fixation à l’EPCR permettant la protéolyse de PAR-1 et l’effet cytoprotecteur. Les actions cellulaires de l’APC sont bénéfiques pour lutter contre les étapes précoces du choc septique bactérien. Les variants à très faibles activités anticoagulantes devraient permettre d’utiliser des doses plus élevées d’APC pour le traitement des sepsis, sans les effets secondaires néfastes de l’activé anticoagulante. Cependant, dans le modèle à Gram+, l’action anticoagulante de l’APC peut contrebalancer ses actions protectrices. E.J. Kerschen et al. (Milwaukee, Etats-Unis) Résumé 1 ASH 2006.

6 APC & Choc Septique J.S. Bae et al. Principes J.S. Bae et al. (Saint Louis, Etats-Unis) Résumé 62 ASH 2006. Protéine C « sauvage » Mutant 60 à 80 fois mieux activé par la thrombine Stabilisation de la boucle 70-80 de la chaîne lourde Introduction d’un pont disulfure Inhibition de la fixation du Ca++ * * La fixation du Ca++ est nécessaire à l’interaction de la PCA avec FVa et FVIIIa. lmportance de la boucle 70 – 80 et de la fixation du Ca++ pour l’activité anticoagulante de l’APC Vers une meilleure approche du traitement des sepsis ? Mais quelle immunogénicité pour le variant?

7 APC & Choc Septique X.V. Yang et al. Principes Protéine C « sauvage » Mutants différents quant à leurs actions biologiques* et leur capacité de fixation sur le récepteur APC Modifications les acides aminés chargés positivement présents dans la partie supérieure de la molécule d’APC * Actions catalytique, anticoagulante, anti-apoptotique et anti-inflammatoire. X.V. Yang et al. (La Jolla, Etats-Unis) Résumé 65 ASH 2006. Importance de pouvoir séparer les structures nécessaires aux différentes activités biologiques de l’APC Désignation des variants moléculaires avec des activités thérapeutiques ciblées et des effets indésirables réduits

8 APC & Choc Septique Au total E.J. Kerschen et al. (Milwaukee, Etats-Unis) Résumé 1 J.S. Bae et al. (Saint Louis, Etats-Unis) Résumé 62 X.V. Yang et al. (La Jolla, Etats-Unis) Résumé 65 ASH 2006. L’ensemble de ces études confirme l’importance du design moléculaire pour améliorer le rapport efficacité/sécurité des biothérapies. L’un des points majeurs reste l’immunogénicité potentielle de ces molécules modifiées. Question relativement théorique dans le traitement aigu du choc septique, l’immunogénicité est et restera une problématique fondamentale dans le traitement d’une maladie chronique.

9 APC & Choc Septique A propos de design D’après Chen J, Anderson JB, DeWeese-Scott C, Fedorova ND et al. MMDB : Entrez’s 3D-structure database. Nucleic Acids Res 2003 ; 31 : 474-7. Chaîne légère (ombrée) Lysines 191 à 193 Arginines 229 et 230 Cette zone, proche de la boucle 70 – 80 fixant le Ca++, est impliquée dans la fixation des facteurs V et VIII. Les mutants de la boucle 70 – 80 ou ceux dont ces acides aminés chargés positivement sont transformés en alanine (non chargée) sont encore capables de cliver le PAR-1*, mais incapables de transformer les facteurs Va ou VIIIa en facteurs Vi ou VIIIi. Protéine C activée * PAR-1 : son clivage après fixation de l’APC sur son récepteur endothélial (EPCR) est à l’origine de l’effet cytoprotecteur.