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Identification dentérobactérie sur microgalerie Microplaque de 96 puits Cupule.

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Présentation au sujet: "Identification dentérobactérie sur microgalerie Microplaque de 96 puits Cupule."— Transcription de la présentation:

1 Identification dentérobactérie sur microgalerie Microplaque de 96 puits Cupule

2 Préparation de la microplaque Introduire à laide dune micropipette, dune pipette graduée stérile de 1 mL ou dune pipette Pasteur 200 µL (soit 4 gouttes) des différents milieux dans les cupules, à proximité du bec bunsen (dans la zone de stérilité).

3 Microgalerie avant ensemencement aa Composés carbonés Cupules didentification pour une souche

4 Ensemencer avec löse ou avec la pipette Pasteur stérile, chaque série de cupules avec la même souche bactérienne. Ici 3 souches différentes peuvent être étudiées en même temps.

5 Microgalerie après culture de 24 heures à 37°C Pour identifier lensemble des caractères biochimiques de ces différentes souches, il est nécessaire de pratiquer des tests complémentaires pour mettre en évidence: La NR La production dindole La TDA La fermentation du glucose par la voie du butane diol

6 Lecture de la 1ère partie de la plaque ONPG + + ADH - - LDC - + ODC - + CIT + - H 2 S + - MAN INO SOR RHA SAC MEL + + +/ /- +

7 Lecture de la 2nde partie de la plaque URE - TDA IND 1 gtte Kovacs VP 1 gtte naphtol et NaOH GEL - GLU + 1 gtte FeCl AMY BNit gtte Nit 1 et Nit 2 Identifier la souche par la méthode d élimination successive. Comparer avec l identification numérique donnée dans la livre API 20E.

8 Identification des différentes espèces dEnterobacteriaceae Klebsiella pneumoniae Serratia marcesens Salmonella gallinarum

9 + Citrobacter freundii + E coli + + Klebsiella pneumoniae

10 Lecture des microplaques Salmonella gallinarum Proteus vulagaris Salmonella spp

11 Proteus mirabilis Providencia Stuartii Salmonella spp


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