Pseudomonas aeruginosa

Présentation au sujet: "Pseudomonas aeruginosa"— Transcription de la présentation:

1 Pseudomonas aeruginosa
La bactérie , sa sensibilité aux antibiotiques , son antibiogramme.

2 INTRODUCTION

3 Pathogène opportuniste Infections graves Résistance aux antibiotiques
Bactérie de l’environnement Pathogène opportuniste Infections graves Résistance aux antibiotiques

4 La bactérie

5 Charles GESSARD En latin : puons =pus cyaneus = bleu foncé Espèce – type du genre PSEUDOMONAS Bactérie ubiquitaire Saprophyte environnement humide : eau et sol Pathogène opportuniste chez les malades immunodéficients Facteurs de pathogénicité+++ Résistance +++ (ATB et ATS) Infections nosocomiales (8 à 10% selon ACAR) et communautaires

6 EAUX : Rivière , eaux usées , boues activées , eau de piscine,
Habitat Réservoirs EAUX : Rivière , eaux usées , boues activées , eau de piscine, eaux minérales , eaux thermales, eaux de boisson . VEGETAUX : Légumes , Salades , fruits , fleurs et aliments ENVIRONNEMENT HOSPITALIER : Matériel chirurgical ( humidificateur , barbotteur , KT , endoscopes…) , Solutions antiseptiques (Eosine aqueuse) Solutions de nettoyage des lentilles de contact Médicaments et produits cosmétiques Lieux humides , lavabos , baignoires , cuvettes , éponges , porte-savon… HOMME : Expectorations, urines , pus ORL , pus articulaires , PV , liquide pleural , selles , zones humides (périné , creux axillaire ) : Colonisation

7 Pouvoir pathogène : Infections : Colonisation
• Infections oculaires: kératites, abcès de cornée, endophtalmies • Infections cutanées bénignes ou graves : Ectyma Gangrenosum, infections de plaies chirurgicales, infections chez les brûlés • Infections respiratoires (mucoviscidose) • Otites – externes aiguës ou malignes – moyennes chroniques Colonisation • Origine endogène ++ – muqueuses pharyngées et intestinales colonisées • adhésion et multiplication • Transmission – croisée manuportée – solution aqueuse ou équipement contaminé

8 Mortalité des IN : Très élevée
– jusqu’à % au cours des pneumopathies – jusqu’à % au cours des septicémies

9 P. aeruginosa : CARACTERES BACTERIOLOGIQUES
MORPHOLOGIE : petit bacille fin 1.5-3µ x µ Gram – très mobile (vol de moucheron) en AEROBIOSE asporulé , SLIME : Couche mucoïde donnant un aspect muqueux à la culture et une plus grande virulence ( s’oppose à la phagocytose)

10 Caractères morphologiques

11 Caractères culturaux

12 Colonies ‘la ’ Colonies ‘sm’ Colonies ‘M’

13 Culture facile sur milieu nutritif simple
Bactérie aérobie stricte Culture entre 8°C et 41°C Production de pyocyanine et de Pyoverdine Dégage une odeur arome de Jasmin par production d’orthoamino-acétophénone

14 Caractères biochimiques
Oxydase + , Catalase + , réduction des nitrates jusqu’au stade N2 Métabolisme respiratoire (MEVAG :Oxydatif) TSI : Lactose - , Saccharose - , H2S –, Gaz- (pente gris métallisée) Citrate +, ADH + , Acetamide +

15 Sa sensibilité aux antibiotiques

16 • Quinolones de première génération • Kanamycine
Résistances Naturelles : • Pénicillines G, A et M • C1G, C2G et certaines C3G • Cotrimoxazole • Macrolides, Cyclines • Chloramphénicol • Quinolones de première génération • Kanamycine • Rifampicine, glycopeptides, ac. fusidique

17 Molécules actives : • Carboxypenicillines : ticarcilline
• Ureidopenicillines : Piperacilline • Ticarcilline+Acide clavulanique • piperacilline +Tazobactam • Monobactames : Aztreonam • Carbapénèmes : Imipénème , Méropénème • ceftazidime, cefsulodine, céfépime, cefpirome • Aminosides : gentamicine, tobramycine, amikacine, nétilmicine,isépamicine • Fluoroquinolones : Ciprofloxacine • colimycine • fosfomycine

18 Mécanismes de résistance de P. aeruginosa
Résistance acquise 1. Modification de la perméabilité 2. Hyper expression efflux actif 3. modification de la cible 4. Hydrolyse enzymatique Résistance naturelle 1. imperméabilité 2. Systèmes d’efflux actifs 3. Hydrolyse enzymatique ( ex:céphalosporinase chromosomique bas niveau)

19 Cellule bactérienne ATB
Inactivation enzymatique (naturelle ou acquise) Efflux actifs (naturels) hyper expression (acquise) Imperméabilité (naturelle ou acquise) ++++ Modification de la cible (acquise) Cellule bactérienne

20 Mécanismes de R. acquise aux β-Lactamines
ENZYMATIQUES: -Penicillinases transférables (PSE , OXA ,TEM) -Cephalosporinases déreprimées -BLSE (PER-1 , OXA , TEM, SHV) -Imipénèmase (IMP-1) NON ENZYMATIQUES : - perte de la porine D2 (modification de la perméabilité) - Hyper expression d’efflux actif - modification structurale du LPS (modification de perméabilité) - modification d’affinité des PLP (modification de cible)

21 Résistance aux Aminosides
RESISTANCE NATURELLE ACQUISE Kanamycine Non enzymatique - Enzymatique

22 Mécanismes de résistance acquise
Résistance non enzymatique : • Inhibition du transport actif (perméabilité) • Efflux (Mex XY-OprM) • Mutation ribosomale (cible) Résistance enzymatique (AAT , ANT , autres enzymes ) Associations fréquentes

23 Résistance aux Fluoroquinolones
• Diminution d’affinité de la cible – DNA gyrase- topoisomérase II, sous-unités A (gyrA) – topo-isomérase IV (parC) • Imperméabilité – porines (oprF) , LPS • Hyper expression de divers systèmes d’efflux Associations fréquentes

24 Son antibiogramme

25 Technique : Méthode de diffusion en gélose
Fiche technique n°1 : Bactéries non exigeantes (fascicule: Standardisation de l’antibiogramme en Médecine humaine à l’échelle nationale selon les recommandations de l’OMS 4ème édition 2005) Inoculum : 0,5 MF Ensemencement de 2 boîtes rondes (90mm ø) de milieu Mueller-Hinton 24mm CAZ TCC TOB CIP IMP ATM FOS GM TIC PIP AN

26 Liste des antibiotiques à tester
Ticarcilline (TIC) Ticarcilline + Acide Clavulanique (TCC) Pipéracilline (PIP) Ceftazidime (CAZ) Aztreonam (AZM) Imipeneme (IMP) Gentamicine (GM) Tobramycine (TOB) Amikacine (AN) Ciprofloxacine (CIP) Fosfomycine (FOS)

27 Contrôle de qualité : souche Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Lecture : Mesurer avec précision à l’aide d’un pied à coulisse , les diamètres des zones d’inhibition , à l’extérieur de la boîte fermée. Comparer ces diamètres aux valeurs critiques de la table de lecture n°10 page 100 du fascicule de Standardisation . Classer la bactérie dans l’une des catégories S , I , R Lecture interprétative : nécessite de connaître les mécanismes de résistances de Pseudomonas aeruginosa .

28 Lecture et interprétation

29 Molécules à tester

30 Bêtalactamines

31 Phénotype Sauvage TIC S PIP S TCC S CAZ S ATM S IPM S

32 Phénotype sauvage Présence d’une céphalosporinase chromosomique inductible Amp C (Antagonisme entre TIC : substrat et l’inducteur IPM) antagonisme

33 Phénotype sauvage : Céphalosporinase chromosomique inductible : Substrats : TIC , CAZ Inducteur : IMP

34 Expression d’une pénicillinase
Haut niveau Résistance à la TIC et à la PIP Restauration par l’Acide Clavulanique de l’activité de la TIC Pseudomonas aeruginosa PSE-1

35 Expression d’une Pénicillinase bas niveau:
Résistance à la TIC et sensibilité à la PIP Restauration de l’activité de la TIC par l’acide clavulanique Pseudomonas aeruginosa PSE-3

36 Expression d’une autre Pénicillinase bas niveau:
Résistance à la TIC et à la PIP Restauration faible de l’activité de la TIC par l’acide clavulanique Pseudomonas aeruginosa OXA-4

37 Phénotype : Céphalosporinase déréprimée

38 Phénotype Céphalosporinase déréprimée :
Hyperproduction de la Céphalosporinase chromosomique (mutation)

39 Phénotype BLSE

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41 BLSE : Image de Synergie entre TCC (Ticarcilline+Acide Clavulanique) et Aztreonam (ou Ceftazidime)

42 Phénotype BLSE

43 Altération Porine D2

44 Altération Porine D2

45 Phénotype : Carbapénèmase VIM-2

46 Phénotype hyper expression d’efflux actif

47 Autres molécules

48 Phénotype Sauvage GM S TOB S AMK S

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51 Antibiotiques 2005 (n=2228) Ticarcilline 17% Pipéracilline 17,2%
Données de résistance (R+I) aux antibiotiques de P.aeruginosa pour l’année Réseau AARN Antibiotiques 2005 (n=2228) Ticarcilline 17% Pipéracilline 17,2% Ceftazidime 13,2% Imipenem 10,7% Gentamicine 20,3% Tobramycine Amikacine 9,2% Pefloxacine 31,7% Ofloxacine 21,6% Ciprofloxacine 15%

52 CONCLUSION Bactérie saprophyte donc naturellement multi résistante
Nombreux mécanismes de résistance acquise avec fréquente intrication de plusieurs mécanismes Difficultés thérapeutiques car Multi résistance+terrain