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Méthodes de dosage d’un antigène par ELISA
(Enzyme-linked immunosorbent assay)
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Principe général Dosage d’un antigène par le test ELISA en sandwich (sans compétition)
Jeffrey M. Vinocur Fixation de l’anticorps de capture (+ lavage) Ajout de l’échantillon à tester (+ lavage) Ajout d’un anticorps de détection (+ lavage) Ajout de l’anticorps secondaire lié à l’enzyme (+ lavage) Ajout du substrat de l’enzyme => mesure du signal et report sur la courbe d’étalonnage => dosage
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Principe général Dosage grâce au test ELISA par compétition
Source : BMedia
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Applications Dosage de protéines en recherche (nécessité de contrôles)
Dosage d’allergènes alimentaires Dépistage de nombreuses pathologies en particulier du VIH Exemples d’enzymes utilisées : peroxydase, béta-galactosidase plaque de microtitrage à 96 puits
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Avantages Test simple, rapide, peu coûteux Détection spécifique Technique sensible Pas besoin d’appareil spécialisé pour détecter le signal
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Inconvénients Dépendante des conditions du milieu Limité par la disponibilité en anticorps spécifique Risque de faux positifs Limite de détection moins bonne qu’en RIA
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