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Méthodes de dosage dun antigène par ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay) 1.

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Présentation au sujet: "Méthodes de dosage dun antigène par ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay) 1."— Transcription de la présentation:

1 Méthodes de dosage dun antigène par ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay) 1

2 Principe général Dosage dun antigène par le test ELISA en sandwich (sans compétition) (1)Fixation de lanticorps de capture (+ lavage) (2)Ajout de léchantillon à tester (+ lavage) (3)Ajout dun anticorps de détection (+ lavage) (4)Ajout de lanticorps secondaire lié à lenzyme (+ lavage) (5)Ajout du substrat de lenzyme => mesure du signal et report sur la courbe détalonnage => dosage Jeffrey M. Vinocur 2

3 Principe général Dosage grâce au test ELISA par compétition Source : BMedia 3

4 Applications Dosage de protéines en recherche (nécessité de contrôles) Dosage dallergènes alimentaires Dépistage de nombreuses pathologies en particulier du VIH Exemples denzymes utilisées : peroxydase, béta-galactosidase 4 plaque de microtitrage à 96 puits

5 Avantages Test simple, rapide, peu coûteux Détection spécifique Technique sensible Pas besoin dappareil spécialisé pour détecter le signal 5

6 Inconvénients Dépendante des conditions du milieu Limité par la disponibilité en anticorps spécifique Risque de faux positifs Limite de détection moins bonne quen RIA 6


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