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TRANSFUSION Groupes sanguins érythrocytaires (système ABO, système RH et système KELL Les examens en immuno-hématologie.

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1 TRANSFUSION Groupes sanguins érythrocytaires (système ABO, système RH et système KELL Les examens en immuno-hématologie

2 1900 Landsteiner découvre le 1er système des groupes sanguins : le système ABO 1940 valide le système Rhésus 1952 Dausset met en évidence le système HLA des GB

3 Les groupes sanguins érythrocytaires Les groupes sanguins érythrocytaires sont déterminés pas des antigènes présents (ou non) à la surface des globules rouges Certains antigènes sont situés dans la Mb lipidique (Rhésus), dautres dans les glycolipides sur la face externe de la Mb du GR (ABO)

4 Les groupes sanguins érythrocytaires Génétiquement induits et déterminés indépendants les uns des autres Antigènes allotypiques cad caractères propres à un groupe dindividus dans une espèce donnée 29 systèmes de groupes sanguins liés au globule rouge Le plus connu et le plus ancien : le système ABO, le plus important du fait de son implication en transfusion sanguine et pour la transplantation dorgane

5 SystèmeNuméroSymboleGène(s)Localisation du gène ABO001ABO 9q34.2 MNS002MNSGYPA, GYPB, GYPE4q28.2-q31.1 P003PP122q11.2-qter Rh004RHRHD, RHCE1q36.13-q34.3 Lutheran005LU 19q13.2 Kell006KEL 7q33 Lewis007LEFUT319q13.3 Duffy008FYDARC1q22-q23 Kidd009JKSLC14A118q11-q12 Diego010DISLC4A117q21-q22 Yt011YTACHE7q22.1 Xg012XG Xp22.32 Scianna013SC 1p34 Dombrock014DO 12p12.3 Colton015COAQP17p14 Landsteiner Wiener016LW 19p13.3 Chido Rodger017CH/RGC4A, C4B6p21.3 H018HFUT119q13.3 Kx019XK Xp21.1 Gerbich020GEGYPC2q14-q21 Cromer021CROMDAF1q32 Knops022KNCR11q32 Indian023INCD4411p13 OK024OKCD14719p13.3 RAPH025MER2 11p15.5 JMH026JMH-- I027I-- GLOB028P-- GIL029GIL-- RHAG030RHAG--

6 Antigènes N° ABOABA,BA1 02MNSMNSsU 03P1 04RHDCEceceCeCw 05LULuaLub 06KELKkKpaKpb 07LELeaLeb 08FYFyaFybFy3 09JKJkaJkbJk3 Tableau de concordance entre nomenclature internationale (ISBT) et nomenclature utilisée en France (Fischer et Race)

7 Le système ABO Le système ABO présente deux caractéristiques qui sont à lorigine des méthodes de groupage et expliquent son rôle important en transfusion et lors des transplantations : La présence ou labsence des antigènes A et/ou B à la surface des GR La présence ou labsence des anticorps naturels anti-A et/ou anti-B dans le plasma correspondants aux antigènes absents sur les GR

8 Les antigènes du système ABO

9 Groupe sanguin Antigènes membranaires Anticorps sériques Fréquence en France AAanti-B45% BBanti-A9% OHanti-A et anti-B43% ABA et Baucun3%

10 Répartition des Ag ABH dans lorganisme à la surface des GR, PN, lymphocytes, monocytes et des plaquettes présents sur de nombreuses cellules de lorganisme (cellules épithéliales, endothélium vasculaire, secrétions salivaires, cellules rénales) à lexception de los, des neurones et de la cornée

11 Les anticorps naturels,réguliers Naturels : Présents dans le plasma dun sujet en dehors de toute stimulation antigénique reconnue (transfusion ou grossesse) Sont dirigés contre les antigènes que le sujet ne possèdent pas sur leur GR Réguliers : existent constamment chez les individus ne possédant pas lantigène correspondant Apparaissent chez lenfant entre 0 et 6 mois (suite à lhétéro immunisation par les bactéries de la flore intestinale) Intérêt primordial en transfusion sanguine en raison du risque dincident dès la 1ère transfusion incompatible

12 Les anticorps immuns, irréguliers Nexistent pas à létat naturel Apparaissent à la suite dune immunisation préalable : grossesse ABO incompatible

13 Détermination du groupe ABO Le groupage ABO repose sur deux épreuves qui doivent être concordantes : Epreuve globulaire dite de Beth-Vincent consiste à rechercher par une technique dagglutination les antigènes présents sur les hématies GR à tester (antigènes à déterminer) + sérums tests connus (anticorps monoclonaux anti-A et anti-B)

14 Réaction dagglutination Formation dun réseau Agglutination

15

16 Absence dagglutination Agglutination

17 Interprétation difficile : Double population avec le sérum test anti-A - Patient A transfusé en O - Patient ayant subi une allogreffe de moelle (A/O ou O/A)

18

19 Détermination du groupe ABO Epreuve sérique dite de Simonin Consiste à identifier les anticorps naturels réguliers dirigés contre les antigènes absents Plasma à tester (anticorps naturels) + GR tests connus Le groupe ne sera définitif quà la suite de 2 déterminations réalisées à partir de 2 prélèvements sanguins différents

20 Groupage ABO O__+++ A __ B_ _ AB+++ __ BETH VINCENT anti-A anti-B SIMONIN GR A GR B

21 Règles de compatibilité ABO POUR LES GLOBULES ROUGES u SYSTEME ABO Ac anti- A Ac anti- B Ac anti-A pas d'Ac A A B B OO ABAB AB donneur universel receveur universel compatibilité identité

22 Règles de compatibilité ABO POUR LE PLASMA A B O AB

23 Le système RH (Rhésus) Système complexe de groupe sanguin On compte 52 antigènes appartenant à ce système En pratique courante seuls 5 sont à connaître : D, C, c, E, e La présence de lantigène D défini le groupe Rhésus positif (85%) son absence le groupe Rhésus négatif Le phénotype Rhésus est déterminé par la présence ou labsence des 5 antigènes : D, C/c, E/e

24 Le système Rhésus comprend 52 antigènes situés sur la membrane du GR

25 Les antigènes ANTIGENESFréquence en France D (RH1)85% C (RH2)70% E (RH3)30% c (RH4)80% e (RH5)98%

26 Phénotype Rhésus (RH) du receveur (fréquence en France) Phénotype Rhésus (RH) du CGR à transfuser par ordre prioritaire D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5) (0,34) D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5) D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5) D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5) D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5) D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5) (0,20) D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5) D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5) (0,12) D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5) D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5) D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5) D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5) D+C+E+c+e+ (RH : 1, 2, 3, 4, 5) (0,12) D+C+E+c+e+ (RH : 1, 2, 3, 4, 5) D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5) D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5) D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5) D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5) D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5) D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5) D+C+E+c-e+ (RH : 1, 2, 3, -4, 5) (0,04) D+C+E+c-e+ (RH : 1, 2, 3, -4, 5) D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5) D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5) (0,02) D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5) D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5) D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5) (0,01) D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5) D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5) (0,15) D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)

27 Les Anticorps du système Rhésus Toujours acquis, secondaires à une allo- immunisation, lors dune transfusion ou dune grossesse Probabilité dapparition fonction de limmunogénicité Lantigène Rh standard (D) est le plus immunogène puis dans lordre E, c et e de classe IgG, hémolysants, capables de traverser le placenta, responsables de la symptomatologie présentée par un nouveau-né Rhésus + né de mère Rhésus - : maladie hémolytique du nouveau-né

28 Règles de compatibilité Rhésus POUR LES GLOBULES ROUGES Rh + = Ag D+ Rh -

29 Les autres systèmes érythrocytaires Importance transfusionnelle car certains de leurs antigènes sont fortement immunisants Système KELL: lAntigène K est un puissant immunogène pour les sujets K- (91% de la population K-) Système Duffy : antigène Fya et Fyb Système MNS : antigène S et s Système Kidd : antigène Jka et JKb

30 Les autres systèmes érythrocytaires Labsence dun Antigène dans l un de ces systèmes ne saccompagne pas danticorps naturels, comme dans le système ABO, mais une transfusion ou une grossesse peuvent provoquer la formation danticorps immuns (allo-immunisation) responsables ultérieurement daccidents transfusionnels ou de MHNN

31 Les examens immunohématologiques Groupage ABO RH1 (RhD) Phénotypage RH et Kell Phénotypage étendu Recherche danticorps irréguliers (RAI) Epreuve de compatibilité au laboratoire Tests de Coombs

32 Exigences relatives aux échantillons : Qualité et quantité : Type danalyseNombre de ml sur anticoagulantNombre de ml sur tube sec ou anticoagulant Groupe ABO.RH1 et phénotype RH.KEL15 RAI chez ladulte5 ABO.RH1 et RH.K et RAI chez ladulte5 RAI chez le nouveau-né5 ABO.RH1 et RH.K et RAI chez le nouveau-né5 Titrage et dosage pondéral anti-RH115 Test de Kleihauer5 Bilan de réaction transfusionnelle55 Bilan de maladie hémolytique du nouveau-né5 AHAI : TCD–Elution–Hémolysine–AF-RAI10 Test de Coombs Direct (TCD)5 - Identification du patient : Nom patronymique / Nom marital / Prénom(s) / Date de naissance / Sexe. Exigences relatives aux documents accompagnateurs : - Etablissement de soins : service demandeur / ligne téléphonique directe - Prescripteur : nom, signature du médecin prescripteur, date de prescription - Préleveur : nom et qualité du préleveur, signature, date et heure du prélèvement - Identification du patient : nom patronymique, nom marital, sexe et date de naissance - Nature des analyses demandées - Renseignements cliniques éventuels - Si une transfusion est envisagée, date et heure prévues, niveau durgence.

33 Les examens immunohématologiques Groupage ABO RH1 correspond à la détermination du groupe ABO indissociable de la recherche du Rhésus standard D le groupage est considéré comme définitif si les résultats sont concordants sur deux déterminations sur 2 prélèvements différents Contexte pré-transfusionnel avéré ou potentiel et contexte périnatal La transmission électronique des résultats est la règle pour la délivrance des PSL

34 Phénotype Rhésus Kell Recherche grâce à lutilisation de sérums tests anti-C, anti-E, anti-c, anti-e et anti-K la présence ou labsence à la surface des hématies des 5 antigènes suivants : C (RH2), E (RH3), c (RH4), e (RH5) et K (KEL1) Contexte prétransfusionnel avéré ou potentiel Contexte pré et périnatal Validation de lidentification danticorps anti- érythrocytaires

35 Phénotype étendu Recherche de la présence ou labsence des antigènes : Jka, Jkb (système Kidd), Fya, Fyb (système Duffy), S, s (système MNS) Champ dapplication : - patient présentant un anticorps irrégulier dans lun des systèmes concernés - à titre préventif chez patients devant recevoir des transfusions itératives - patients en instance de greffe

36 Recherche dAnticorps Irréguliers (RAI) NB : Les anticorps immuns sont décelables avec un maximum de probabilité du 7ème au 15ème jour après la transfusion Examen consistant à dépister et identifier les anticorps dirigés contre les antigènes érythrocytaires autres que A et B dans le sérum à étudier grâce à une gamme dhématies tests Délai de réalisation de 45 mn à plusieurs heures Validité 72H

37 Recherche dAnticorps Irréguliers (RAI) Champ dapplication : Obligatoire chez tout patient susceptible dêtre transfusé Contexte de greffe ou de transplantation Contexte pré ou périnatal Chez le patient transfusé itératif en bonne place au cours des séries de transfusion Chez le patient transfusé dans le cadre du suivi post-transfusionnel (dans un délai de 1 mois après le dernier épisode transfusionnel)

38 CAT en cas durgence hémorragique Urgence vitale immédiate : distribution sans délai Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI pas de groupe ni de RAI si non disponibles CGR O sans hémolysines Urgence vitale : délai de distribution inférieur à 30 minutes Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI pas de RAI si non disponible nécessité de groupe ABO conforme Urgence « relative » : délai de distribution de heures Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI nécessité de groupe et RAI conformes

39 CHOIX DES CGR EN URGENCE VITALE Dans le cadre dun dépôt durgence ayant en stock des CGR : O- (D-C-E-c+e+K-) non réservé à la transfusion isogroupe O+ (D+C+E-c-e+K-) non réservé à la transfusion isogroupe En fonction de D et Rhésus-Kell PatientCGR à transfuser DRhésus Kell D non connunon connuO-D-C-E-c+e+K- D négatifconnu ou nonO-D-C-E-c+e+K- D positifnon connuO+D+C+E-c-e+K- D positifconnu : C+O+D+C+E-c-e+K- D positifconnu : C-O-D-C-E-c+e+K-

40 Epreuve directe de compatibilité au laboratoire EDCL Qualification biologique du don Consiste à tester le sérum du receveur vis-à-vis du CGR à transfuser (lobjectif étant de détecter certains Ac masqués par la présence dautres Ac, ou des Ac rares) Validité 72H Champ dapplication : Receveur présentant ou ayant présenté un ou plusieurs allo-anticorps anti-érythrocytaires Nouveau-né présentant un test de Coombs positif ou né de mère allo-immunisée

41 Test de Coombs Permet la mise en évidence de la sensibilisation in vivo des hématies humaines par des anticorps grâce à lutilisation dun réactif appelé antiglobuline humaine Champ dapplication : Maladie hémolytique du nouveau-né Incident transfusionnel Anémie hémolytique autoimmune

42 Recherche d'anticorps fixés sur les hématies Ac non spontanément agglutinables Hématies fœtales ayant fixé l'Ac complexe agglutinant + anti-gammaglobulines humaines


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