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Rétrovirologie appliquée au diagnostic et au suivi des patients en PED François Simon – Constance Delaugerre Service de Microbiologie Service de Microbiologie.

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1 Rétrovirologie appliquée au diagnostic et au suivi des patients en PED François Simon – Constance Delaugerre Service de Microbiologie Service de Microbiologie CHU saint Louis – Paris cedex 10 CHU Saint Louis Paris

2 RETROVIRIDAE Retroviridae : grande famille Associés à de nombreuses pathologies incluant : vtumeurs à développement plus ou moins rapide vsyndrome neurologique vimmunodéficience Tous les rétrovirus ont : une structure une organisation génomique un mode de réplication similaires

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4 Première preuve du passage inter espèces HIV-1 group N & SIVcpz env gag-pol virus retrouvé uniquement au Cameroun particularité = virus recombinant entre VIH-1 groupe M (région Pol) et SIV cpz pour lenveloppe

5 Un nouveau VIH : passage entre les SIV du gorilles et lespèce humaine le groupe P

6 Diversité du VIH HIV-1 4 groupes HIV-2 HIV-1 O HIV-1M HIV-1N A C virusmosaïques B D (E) G H (I) J F A B C D E CRF01-AE* Plus de 40 formes recombinantes ou CRFs ou CRFs CRF04-cpx* K F H G A B CRF02 ? HIV-1 P

7 Groupe M = sous-types « purs » & formes recombinantes circulantes actuelles

8 Distribution géographique des sous-types et des formes recombinantes B B, F1, B/F, C B AG, A, G A, A/G, C, D, F1, F2 G, H, J, K, A/E, O, N C, A, D C B A/E, B B, B/C, A/E A, A/B, B, C

9 Impacts de la diversité génétique du VIH Diagnostic : détection du VIH-0 mise en défaut en 1994 Quantification : sous-quantification/non quantification de sous-types VIH-1 (2) (si CV basse ou indétectable en labsence de ttt, associée à un taux de CD4 bas), VIH-2 Sensibilité aux antirétroviraux : Impact du polymorphisme du gène de la protéase (5) Prédisposition génétique du sous-type C à la résistance à léfavirenz (6), à la névirapine (7), au ténofovir (8) Transmissibilité : TME plus importante des sous-types D (9) Pas dimpact des sous-types sur la réponse au traitement (10, 11) Vaccination : reste lenjeu majeur !

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11 Génome et protéines structurales enzymes Gènes Protéines Précurseurs macro-protéines env tat nef rev tat LTR pol gag vif vpu vpr rev p160 p55 p68p31/34 p17 p24 gp120 gp41 gp160 enveloppe capside LTR

12 VIH - cycle de réplication - interaction GP120 et recepteur CD4 - interaction GP41 et membrane cellulaire fusion des membranes - ARN viral hybride ADN/ARN ADN Reverse transcriptase polymérase - intégration au génome (intégrase): ADN proviral - activation transcription ADN proviral

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15 Risque de transmission en fonction des stades de linfection Primo-infectionPhase asymptomatique SIDA 1/1000 1/ /25 1/50 à 1/1000 Galvin S, Cohen M Nat Rev Micro 2004

16 Quels sont les examens biologiques qui permettent de faire le diagnostic de linfection à VIH-1 ? à VIH-2 ?

17 Les moyens du diagnostic ELISA le plus souvent (en UE) combinés ( de 4eme génération dans lUE) : détectent Antigène VIH et anticorps anti VIH1 & VIH2 Tests dit rapides sont des dispostifs unitaires de réalisation simple sans apport de matériel et ne nécessitant pas de chaine du froid Western Blot confirment la présence des anticorps anti VIH-1 ou VIH-2 LARN plasmatique signe la présence dun VIH réplicatif à partir des cellules infectées. Les tests dit de « charge virale » quantifie cette réplication en « copie » de virus par mL de plasma LADN proviral ou ADN intégré correspond à la présence du provirus dans les cellules infectées Les tests de résistance recherchent la présence de mutations du génome VIH sous la pression des antirétroviraux

18 Cinétiques des marqueurs de linfection Cunningham et al

19 Les moyens du diagnostic Les EIA combinés ( de 4eme génération dans lUE) : détectent Antigène VIH et anticorps anti VIH1 & VIH2 Les tests dit rapides sont des dispositifs unitaires de réalisation simple sans apport de matériel et ne nécessitant pas de chaine du froid Les Western Blot confirment la présence des anticorps anti VIH-1 ou VIH-2 LARN plasmatique signe la présence dun VIH réplicatif à partir des cellules infectées. Les tests dit de « charge virale » quantifie cette réplication en « copie » de virus par mL de plasma LADN proviral ou ADN intégré correspond à la présence du provirus dans les cellules infectées Les tests de résistance recherchent la présence de mutations du génome VIH sous la pression des antirétroviraux

20 Nature de lantigène de capture des anticorps Virus entier purifié Protéines virales natives ou recombinantes Peptides de synthèse Détection des anticorps Totaux (IgG + IgM) IgG ou IgM ELISA combinée : détecte anticorps et antigène Expression des résultats Qualitatif (positif ; négatif ; douteux) Quantitatif (titre) Diagnostic indirect : Sérodiagnostic de dépistage ELISA

21 Microplaque ELISA : Les puits color é s correspondent à des positivit é s Test ELISA indirect (Infection par le VIH)

22 Exemple dautomates EIA (VIH & hépatites et autres ) EIA 4ème génération Ag + Ac Architect Abbott Axym Abbott Vidas bioMérieux Microplaques Behring-Siemens

23 Tests de diagnostic rapide (TDR) : Utilisés depuis plus de 19 ans Contrôles interne des tests Réaction positive : Présence possible danticorps anti VIH-1 C : bande contrôle de bon fonctionnement du test T : bande de réactivité anti VIH c c T Test VIKIA VIH ½, bioMérieux Test Determine HIV 1-2, Inverness

24 western blot VIH-1 avec les poids moléculaires des principaux antigènes (New Lav blot 1, Biorad-Pasteur). la confirmation des infections par le Western Blot

25 Valeurs prédictives la sensibilité d'un test est sa capacité de donner un résultat positif lorsque linfection est présente. la spécificité est la capacité d'un test de donner un résultat négatif lorsque linfection n'est pas présente. La valeur prédictive positive est la probabilité que le virus soit présent lorsque le test est positif. La valeur prédictive négative est la probabilité que le virus ne soit pas présent lorsque le test est négatif. La valeur prédictive est fonction de la sensibilité et de la spécificité du test ainsi que de la prévalence de la condition à l'étude

26 Sensibilité, spécificité, valeur prédictive a représente le nombre d'individus malades avec un test positif (les vrais positifs), b représente le nombre d'individus non-malades avec un test positif (les faux positifs), c représente le nombre d'individus malades avec un test négatif (les faux négatifs), d représente le nombre d'individus non-malades avec un test négatif (les vrais négatifs) maladeNon malade Test + Test - ab cd sensibilité = a / (a + c) spécificité = d / (d + b VPP = a / (a + b) VPN = d / (c + d)

27 Anticorps anti Enveloppe ARN Années Phases précocesInfection chronique Ag p24 AC -p24 p34 Marqueurs moléculaires et sérologiques lors de linfection par VIH-1

28 Daprès Cunningham et al 2009 Tests rapides 4 gen EIA

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30 VIH-2 sous type B VIH-2 sous type A WB HIV-1WB HIV-2

31 Principes généraux des TDR Immuno-filtration ou immuno-chromatographie ligne contrôle Ligne du test Conjugé avec or colloidal +proteine A. Ac anti anticorps humain Antigene HIV-1/2 Or Colloidal Conjugé à la Proteine A AC Humains non HIV Ac HIV-1/2 Prélèvement

32 Sang total : sang non décanté avec globules rouges et plasma, en général sang capillaire ou veineux non centrifugé. Ne peut être conservé Le papier filtre serait une alternative –Contrôle, biologie moléculaire… Sérum ou plasma : recueil après centrifugation en milieu spécialisé = utilisable pour tous les autres tests, idéal pour conservation, traçabilité « Salive » : recueil standardisé entre gencive et lèvre inférieur : liquide créviculaire ? Les matrices des TDR

33 TDR versus ELISA Les TDR actuels marqués CE et utilisés sur sérum : - ne détectent que les anticorps -être considérés comme équivalents en terme de sensibilité en primo infection aux des tests ELISA de troisième génération pour les meilleurs dentre eux -- difficilement évaluable sur sang total /liquide crévicualaire pour les primo infections Les test TDR avec détection antigène p24 et anticorps : - Marquage CE en Équivalent quatrième génération ? - Difficilement évaluable pour les primo infections

34 Marché mondial anarchique : > 80 tests, nombreux fabricants,vendeurs et revendeurs (voir du même test !)

35 Des marquages FDA USA et CE UE différents (sauf OraQuick)

36 Tests rapidesTests ELISA 4 ème génération Avantages facilité demploi, stockage à température ambiante, réalisable en tout lieu, tout endroit résultats satisfaisants en termes de sensibilité et de spécificité lors de la phase chronique de linfection grande sensibilité y compris en primo- infection excellente spécificité facilement évaluable sur les panels congelés, automatisables à haut débit Réalisés à 37° prix avantageux traçabilité et enregistrement informatique des résultats. Inconvénients manque de sensibilité dans les phases précoces de linfection manque de traçabilité, les résultats ne pouvant être enregistrés, subjectivité de lecture problème délimination des déchets infectieux si utilisés en dehors des circuits de soins habituels prix généralement élevé nécessité de chaînes de froid délectricité et de structures minimales de laboratoire Avantages et limites des systèmes de dépistage pour le VIH

37 Ré-évaluation des 4 tests CE Sur sang total et du test « salive » et du Determine « 4eme génération » en cours à St Louis (JM Molina- W Rozembaum – F Simon) 4 tests marqués CE pour lutilisation sur sang total, un pour la salive Determine Inverness Insti Biolytical OraQuick sang et salive Vikia bioMérieux

38 Resultats - patients VIH+ * p tests ont été lus comme négatifs particulièrement avec Oraquick salive - 36 patients, soit 20B, 13 non B, 2HIV-2, 1 HIV0 - taux élevé dinvalides avec le Determine 4 th - Aucune détection dag p24 Ag y compris lors des primo infection y compris en présence confirmée de p24 sur sérum à 380pg/ml n =200Oraquick Oral fluid Oraquick blood Vikia blood Determine blood Determine 4 th blood INSTI blood Negatif Douteux Invalide Positif Sensibilité86.5% *94.5%98.5%94.9%95.8%99%

39 Limites des TDR Difficulté dévaluation sur sang total et salive des primo infections Sensibilité moindre (primo-infection) que les tests Elisa donc risque de faux-négatifs y compris dans les mois suivants la séroconverion en EIA fréquence des faux positifs Lecture subjective Archivage difficile (photo ? ) Négligence des autres IST, absence de TDR pour HBV marqué CE obligeant à EIA, coûts

40 Un TDR négatif 3 mois après lexposition supposée signera labsence dinfection pour ce risque Ce délai est lié à la moindre sensibilité des TDR en primo infection et à lincidence des VIH dans notre pays couplée à la diversité génotypiques des souches en circulation Quand rendre un TDR négatif par rapport à un risque

41 TDR Sang total + ou +/- HIV négatif Sauf exposition VIH dans les 3 mois précédents ou situations dimmunosuppression profonde ou de variants rares Recherche Ac ant VIH-1 et VIH-2 et d Ag P24 par un test Elisa 4ème génération (EIA) et par un Western Blot (WB) HIV positif EIA + & WB + Infection VIH confirmée A différencier entre VIH-1 et VIH-2 - réaction non spécifique - Erreur didentification Primo-infection Probable ou VIH-2 TDR Sang total - Nouveau prélèvement Nouveau contrôle sérologique et explorations complémentaires = ARN, suspicion variants EIA – WB + ou - EIA + WB + EIA + WB +/- ou -

42 Aids, test at home for HIV, 21,95 a reliable, fast and discret test

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44 QUIZ

45 Quantification des CD4

46 Minicytomètres de flux Apogèe A40 Easy Guava CD4Cyflow Counter

47 Charge virale ARN VIH-1 Suivi biologique de linfection à VIH-1 Quantification ARN VIH-1 Plasma EDTA (LCR)

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51 Plasma RNA VIRAL LOAD Ultra sensitive HIV-1P24 Cavidi RT ExaVir Quantification du VIH en PED

52 La charge virale : une référence A D C A D C CRF02 A C D CRF01 F G H J K, CRF11-cpx Group O N P CRF02-AGVIH-2 C Branched DNA (Versant) RT rt PCR (NexSys ; 2010) RT PCR (Monitor) Easy V V1.0, 1.2 RT PCR (LCx HIV RNA) RT rt PCR (m2000rt) NASBA RT rt PCR (« in house ») Siemens RT rt PCR (TaqMan 48) V2.0 RT rt PCR (TaqMan 48) Easy V V Re commercialisé en Afrique

53 DBS & DPS pour la charge virale et la résistance Peut on pooler les plasma pour une surveillance ? Pourrait améliorer le monitoring sans altérer la sensibilité. Richman DDRichman DD, Benson CA, Little SJ et al AIDS Oct 23;23Benson CALittle SJ –Dried Serum Spots from 47 drug naïve and 15 treated patients –VL > 100,000 protease 100% RT 100% –10000

54 Abbott Real-time Assay DBS sensbilité % positive with DBS plasma (copies/mL) N=497 7 centres Scott et al. SA AIDS 2009

55 Extraction- Amplification dédiées/ Trousses normalisées/ FDA/ CE IVD Fermé/ Ouvert Sous-types non B/ Validation littérature Mainte- nance - Suivi Programme Afrique Politique commerciale OuiOui/Oui M+O+N / ± Europe & régionale africaine ± En discussion LCx m2000rt Oui ~ 2007 Oui/Oui M+O+N / ? Europe & Afrique du Nord & Afrique du Sud Formations ± Oui A340 A440 NexSys ? Oui Oui/Oui M+O / ± Europe & régionale africaine Oui (Institut de Bamako) Oui Oui/Oui M / ± Afrique du Sud et régionale africaine Programme AmpliCare (formation/ maintenance/ politique de prix) Oui (« CV à 17 ) Cobas Monitor Cobas TaqMan Non N on /Oui M / ± Collabo- rations universi- taires nord-sud Cellule Recherche et Pays en Dévelop- pement Biocentric CV « générique » ? Abbott

56 Technique ANRS PCR en temps réel pour la quantification de lARN VIH-1 plasmatique (Rouet et al. 2006) Objectif : Disposer dun test de recherche fiable, mais aussi peu coûteux et faisable dans les pays du Sud - Initialement, commande séparée des différents réactifs. –Depuis juillet 2005, test disponible sous la forme dun kit réunissant tous les réactifs (extraction Qiagen, mix, sonde, amorces, et standard pour la gamme de quantification externe). –Kit Generic HIV Charge Virale, Société BIOCENTRIC (Bandol, France). Ref. TR (220 tests) Prix TTC : 7/test –Meilleure visibilité du test.

57 Emploi en routine du test ANRS ARN VIH-1 dans les différents sites ANRS des pays du sud Principales applications cliniques : - Diagnostic pédiatrique précoce - Monitorage virologique de lefficacité des multi-thérapies antirétrovirales Etudes/essais ANRS et collaborations internationales : -Burkina Faso : Essai Burkiname, cohorte Yérelon, essai Kesho-Bora (ANRS/OMS), essai Burkinavi (OMS) -Cambodge : Essai Camelia (NIH), essai PTME (MSF) -Congo : PTME (Croix Rouge) -Côte dIvoire : Cohorte Primoci, essai Trivacan, Programme PMTCT+, CEPREF -Gabon : PTME (Croix Rouge) -Thaïlande : PTME -Vietnam : Essai Vietar Suivi des patients externes : -Exemple du Cameroun (autorisation ministérielle Nov. 2006)

58 Limitations de la charge virale Machines, maintenance (laser ++) Souvent limitée aux seuls produits du fabricant techniciens formés Un laboratoire propre contôles de qualité Extraction peut être facilement automatisée (MiniMag)

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60 Is p24 as a predictor of mortality in adults in Africa. 198 Treatment-naive individuals baseline, p24, RNA, CD4 and clinical p24 correlated with HIV-RNA (P<0.0001, R: 0.44) Ten percent of p24 but only 1% of HIV-RNA measurements was undetectable p24 predicted Centers for Disease Control and Prevention category (P<0.001) stronger than CD4 count (P=0.34) in multivariate logistic regression p24 predicted mortality in univariate Cox analysis (P<0.0001) and in multivariate analysis, but it was inferior to HIV-RNA and CD4 count. Schüpbach JSchüpbach J. AIDS Rev Apr-Jun;4(2):83-92

61 Adaptation of the ultrasensitive HIV-1 p24 antigen assay to dried blood spot testing. PCR on DBS DNA and/or plasma RNA HIV-1 + in 38 Tanzanian children (18 C, 9 A1, 8 D, 1 AC, 1 J-like, and 1 ?) DBS-p24, 32 (84%) of 38 (subtype D FN) DBS DNA, 30 (79%) of 38 ; plasma-p24, 23 (85%) of 27 ; plasma RNA, 30 (100%) of 30. Schüpbach JSchüpbach J. Schüpbach J. J Acquir Immune Defic Syndr Mar 1;44(3): Schüpbach J

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63 Le premier test rapide pour la détection de lantigène p24 manque de sensibilité Problème de détection des non –B AgP24 (pg/ml) > Référence EIA P24 VIDAS Determine 4eme G Ag POSITIF JC Tardy, Lyon HIV-1 p24 positive sera by EIA Les améliorations de ce type de tests sont en cours. A surveiller

64 Principe du test HIV RT Cavidi Exavir :

65 Principe du test HIV RT Cavidi Exavir : 2

66 Simon et al, AIDS Feb 14;17(3):331-6.

67 HIV RNA copies/ml Number of samples % detected Vs. 3 (n) % (30) , % (33) , % (35) 10, , % (45) >50, % (42) Cavidi ExaVir Load V 3.0 JCM Accepts, published online 2009

68 Plasma RT activity assay for HIV viral load Simon et al, AIDS Feb 14;17(3):331-6.

69 Trousse PCR rt ExaVirLoad version 2 ELISA ultra sensible manufacturer Abbott - Roche bioMérieux CavidiPerkin Elmer Principe real time PCR Activité transcriptase inverse (Seuil 400 copies/ml) Antigénémie p24 sensibilisée (Seuil 400 copies/ml) Detection Internal control of procedure ELISA targets Pol LTR (NEC152/NEC131) Gag LTR+Gag polgag Sous-types du VIH-1 ? M (A to G) + O + VIH-2 M (A to G) + O ? FDA CE IVD Yes No Timing for results4-6 h 2,5 days 3 h machinery Maintenance (5000 /y) Cost/test15 $ [10-15 ]15 10

70 Is Routine Laboratory Monitoring of Patients on HAART Necessary to Improve Treatment Outcomes?

71 Is Routine Laboratory Monitoring of Patients on HAART Necessary to Improve Treatment Outcomes? The DART Study DART compares outcomes in patients on antiretroviral therapy according to whether they received routine laboratory and clinical monitoring (LCM), or clinically driven monitoring (CDM) alone. LCM group would be monitored in a manner similar to how patients in the developed world are monitored, CDM group would be managed according to clinical symptoms only, without routine access to laboratory tests. James G. Hakim, MBChB, MMed, MSc, FRCP:

72 Is Routine Laboratory Monitoring of Patients on HAART Necessary to Improve Treatment Outcomes? 3316 participants in Uganda and Zimbabwe World Health Organization (WHO) stage II, III, or IV HIV disease, CD4+ cell count < 200 cells/mm3 Patients were randomized on a 1 to 1 basis to the 2 study arms. Twelve-weekly biochemistry analyses, full blood counts, and CD4+ cell count were conducted in both study arms. Results of all these tests were provided in the LCM arm, CDM arm, results were only provided if clinically indicated or if there was grade 4 toxicity. CD4+ cell count results of patients in the CDM arm were not provided to physicians under any circumstances. James G. Hakim, MBChB, MMed, MSc, FRCP:

73 Results median CD4+ cell count 86 cells/mm3. more than three quarters had either WHO stage III or IV disease. Most received tenofovir with zidovudine/lamivudine (74% to 75%); 16% in each arm received nevirapine and 9% received abacavir. After 5 years of follow-up, survival rates were high in both study arms90% in the LCM arm vs 87% in the CDM arm. However, access to laboratory monitoring in the LCM arm was associated with a small but significant reduction in survival (hazard ratio [HR] CDM:LCM: 1.35; 95% confidence interval [CI]: ; P =.004), difference was observed only after 2 years of treatment. James G. Hakim, MBChB, MMed, MSc, FRCP:

74 2009 Revisions of WHO recommendations on use of Antiretroviral Therapy (ART) HIV/ATC October 2009

75 Proposed WHO 2009 Criteria for the ART Initiation in adults and adolescents (ART Guidelines Meeting, October/2009) Clinical SituationART initiation Recommendations Quality of Evidence Strength of Recommendatio n WHO clinical stage 3 or 4Start ART irrespective of CD4 Moderate- High Strong WHO clinical stage 1 or 2Need CD4 to decideVery LowStrong CD4 < 350 cells/mm 3 Start ART irrespective of WHO stage ModerateStrong Active TBStart ART irrespective of CD4 ModerateStrong PregnancyStart ART for stage 3/4 or CD4 < 350/mm 3 ModerateStrong Active chronic hepatitis BStart ART irrespective of CD4 LowStrong

76 Proposed WHO 2009 Preferred Regimens for ART Initiation in adults and adolescents (ART Guidelines Meeting, October/2009) Clinical Situation Preferred ART Regimen Quality of Evidence Strength of Recommendatio n ARV naive HIV+ Adults AZT+3TC+NVP or TDF+3TC/FTC+EFV Moderate Strong ARV naive HIV+ Adolescents AZT+3TC+NVP or AZT+3TC+EFV Moderate Strong ARV naive HIV+ pregnant women AZT+3TC+NVP or AZT+3TC+EFV (2 nd trimester onwards) Moderate Low Strong Weak NVP exposed HIV+ pregnant women (no ARV tail, < 12 months) PI containing regimen 3 NRTI Low Very Low Strong Weak ART Naive HIV + with active TB AZT+3TC+EFV or TDF+3TC/FTC+EFV Moderate Strong ART naive HIV+ with active chronic hepatitis B TDF+3TC/FTC+ EFV or TDF+3TC/FTC+ NVP Moderate Strong

77 Recommendations on Lab Monitoring Recognise and describe the following phases of HIV management : Phase of HIV managementRecommendedDesirable At HIV diagnosisCD4HBsAg, ?HCV test Pre ARTCD4 (6 monthly)Viral Load At start of ARTCD4 Hb for AZT Renal screen for TDF On ARTCD4Viral load At clinical failureCD4Viral load At immunological failureViral load Hb recommended prior to AZT use. TDF can be used in absence of renal screening or monitoring (benefits outweigh the risks). Symptom directed laboratory monitoring for toxicity is recommended. Simplified algorithms for ART failure being developed and evaluated. Viral load threshold of 5000 copies /ml used for detect or confirm treatment failure.

78 RESISTANCE AUX ANTIRETROVIRAUX

79 Modélisation de la cinétique de décroissance de la charge virale plasmatique chez un patient qui débute un traitement antirétroviral efficace Durée du traitement antirétroviral efficace (jours) Seuil de détection Charge virale en ARN plasmatique 1ère phase (T1/2 : 1 jour) 2ème phase (T1/2 : 14 jours) Réplication virale résiduelle Virus issus du « réservoir » lymphocytaire Eradication ?

80 Taux derreur de la TI: 1/ nucléotides Production virale: particules par jour Toutes les mutations pré-existent avant traitement Taux de recombinaison: 5 à 10 évènements par cycle Evolution constante de la quasiespèce Demie-vie dun virus plasmatique = 0.3 jours Demie-vie des cellules infectées = 2.2 jours Pourquoi y a til sélection de virus résistants ?

81 Pression de sélection antirétrovirale Sélection de variants résistants Suppression incomplète Défaut de puissance Taux plasmatiques insuffisants Défaut dobservance Pré-existence de résistance Charge virale Temps Variants sensibles Variants résistants Début du traitement

82 Mutations de résistance Présentes dans les gènes cibles des antirétroviraux : -->TI, protéase, gp41, intégrase Elles confèrent un avantage réplicatif aux virus en présence de drogues : -->sélection de variants mutés Certaines ont un effet négatif sur la fonction de lenzyme M184V (sauvage) position (muté)

83 Facteurs influençant le profil de résistance Barrière génétique de lantirétroviral Concentration de lantirétroviral (plasma, compartiment) Combinaison antirétrovirale (drogues associées) Niveau de charge virale Sous type viral VIH-1

84 Analyse des mutations des gènes RT, protéase, gp 41 VIH-1 associées à la résistance aux traitements antirétroviraux Génotype de résistance -VIH1 Choix du premier traitement Gestion des échecs virologiques

85 Mutations aux INTI Didanosine Emtricitabine Lamivudine Stavudine Zidovudine Abacavir Tenofovir

86 u Liste International AIDS Society USA (www.iasusa.org) –Corrélation avec données phénotypiques u Algorithmes dinterprétation –groupe résistance AC11 - ANRS (www.hivfrenchresistance.org) »Corrélation avec réponse clinique –Stanford University (www. hivdb.stanford.edu) »Pondération des mutations Génotype de résistance -VIH1 Analyse des mutations de résistance gènes RT, protéase, gp41, intégrase Interprétation complexe

87 INDICATIONS DES TESTS DE RESISTANCE (Rapport Yéni 2008) RECOMMANDE –Primo-infection –Dés le diagnostic ou avant initiation du traitement –Tous les échecs thérapeutiques (réplication virale sous traitement) –Grossesse –Nouveau-né –Enfant (diagnostic et échec) NON RECOMMANDE –AES Accident dexposition au sang/sexe


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